基因敲除小鼠（KO/CKO）

吵翻了！南大教授卖 KO 小鼠，万元小鼠是暴利还是白菜价？

年高翔回到母校南京大学担任教授。2001 年，高翔带领南京大学团队创建了南京大学模式动物研究所和教育部 「模式动物和疾病研究」实验室。在项目建设期间，高翔建立了国内的第一个条件性基因剔除小鼠。 图片来源：南京大学 当时，在国内模式动物资源仍然比较稀缺，高翔认为成立一家模式动物公司对推动这一领域发展非常重要。于是，2017年他成立了药康生物，担任董事长。 2018 年高翔推出「斑点鼠计划」，对小鼠基因组中可设计策略的所有蛋白编码和非编码基因逐一进行 CKO/KO 模型制作，目前已经建成全球最大

我该给小鼠找啥样的对象，他们才愿意生？

。随后，才能进行杂合子小鼠的相互交配。注意点：-不同的 KO Founder 之间不能相互交配。-不同的 KO Founder 的子代之间也不建议相互交配。条件性基因敲除获得 flox 纯合同时 Cre 阳性的小鼠（f/+；Cre-）×（f/+；Cre+）→ f/f；Cre+Flox 小鼠在去除 Neo 基因以后（CRISPR/Cas9 途径获得的 CKO 小鼠省略此步骤），获得仅含有两个 loxP 位点的 flox 杂合子小鼠（flox/+，可缩写成 f/+）。 flox 杂合子（f/+）小鼠与组织

小鼠基因型怎样鉴定更严谨？

方法： 图 1. CKO 正确重组双臂 PCR 鉴定示意图 如图 1 所示，F1 与 R2 为目的位点臂外引物，只有 Donor 正确重组入靶位点，双臂 PCR（5’arm 和 3’arm）才能扩增出预期条带，进而判断模型为正确重组模型。 TIPS 由于 KO（基因敲除）或 TG（转基因）小鼠模型鉴定较为简单，本文只讨论模型制作时带有重组 Donor 的小鼠模型的鉴定方法。 但双臂 PCR 鉴定存在一定的缺陷： 无法鉴定模型是否有随机插入。F1 与 R2为目的位点臂外引物，无法鉴定出未在目的