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- 动物实验模型构建
- 上海
- 2026年01月01日
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 提供商：
上海达为科生物科技有限公司
- 服务名称：
哮喘模型构建服务
过敏性哮喘模型
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- 致敏剂：卵清蛋白（OVA）最常用，其他包括屋尘螨（HDM）、花粉、真菌蛋白等。
- 方法：
- 小鼠模型：腹腔注射OVA（80 μg吸附于4 mg氢氧化铝）致敏，2周后雾化吸入1% OVA激发。
- 豚鼠模型：连续10周OVA雾化诱导气道重塑，表现为血氧分压降低。
- 适用研究：Th2型炎症、嗜酸性粒细胞浸润机制及抗组胺药物筛选
模型评价体系
- 行为学指标：激发后20-30秒内出现呼吸急促、抓耳挠腮等典型症状。
- 肺功能检测：气道阻力（RL）、用力呼气容积（FEV₀.₄/FVC）。
- 病理学分析：HE染色评估炎细胞浸润，PAS染色检测杯状细胞增生。
- 免疫学指标：血清IgE、IL-4/IL-5水平，BALF中嗜酸性粒细胞计数。
- 药效学验证：药物干预后症状缓解（如地塞米松降低RL）。
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文献和实验相关实验
重组插入目的片段，启动子，终止子等是构建完整表达框时所需要的元件，标签序列等可以用于表达鉴定等实验。在质粒载体设计及构建工作中，根据实验的需求情况可以增减质粒载体上的具体元件，以及插入实验需要的相关基因。 2、质粒载体构建的常规流程 通常质粒载体构建的操作需要经过下图所示流程。其中目标序列确定需要根据实验需求以及查阅生物信息数据库的相关序列来确定。目标序列 PCR 扩增则根据实验需求以基因组 DNA 或者反转录得到的 cDNA 为模板，经过高保真 PCR 实验扩增得到相关目的片段。质粒载体确定由实验
效应机制siRNA不仅可引导RISC切割靶RNA,而且可作为引物在RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP)作用下以靶mRNA为模板合成新的dsRNA新合成的长链dsRNA同样可被RNaseⅢ样核酸酶切割、降解而生成大量的次级siRNA.次级siRNA又可进入合成-切割的循环过程,进一步放大RNAi作用.这种合成-切割的循环过程称为随机降解性PCR（random degradative PCR）.三、RNAi表达载体的构建1. 目的基因的确定（1）、检索文献获取有实验证明有效的靶点序列（核对
视频概括：1）质粒的基础知识；2）质粒载体的构建流程；3）片段重组的构建方案；4）质粒载体构建的常见问题分析
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