探针法结膜支原体实时定量PCR试剂盒

探针法结膜支原体实时定量PCR试剂盒

Probe-quantitative Real-time PCR Kit for Mycoplasma Conjunctivae

 

货号：Mqt-con-20      规格：20个反应

货号：Mqt-con-50      规格：50个反应

货号：Mqt-con-100     规格：100个反应

 

储存：-20度，避光保存，保质期一年。避免反复冻融。

 

试剂盒特点：

1，         可以特异性检测结膜支原体，与其他生物无交叉反应。

2，         灵敏度高，检测极限为反应液中4个基因组。

3，         使用的DNA聚合酶具有抗抑制能力强和热稳定性好的特点；采用热启动方式，可抑制非特异性扩增，降低背景荧光。

4，         带有阳性对照样品，可用于检验试剂盒有效性。

5，         带有UDG酶和dUTP，可降低残留DNA的污染。

 

结膜支原体（Mycoplasma Conjunctivae）是绵羊、山羊、羚羊等反刍动物的传染性角膜结膜炎（IKC）的主要病原体，在全球广泛分布于家养的反刍类动物中。结膜支原体的致病性与其黏附、免疫逃逸和毒性代谢产物相关。该菌通过表面黏附素（如P48、P80等膜蛋白）附着于宿主结膜上皮细胞，避免被泪液冲刷清除。黏附后，其分泌的蛋白酶和核酸酶可能破坏宿主细胞屏障，促进细菌定植。此外，支原体膜脂成分（如脂蛋白和糖脂）可激活宿主的Toll样受体（TLR2/TLR6），引发炎症反应，导致中性粒细胞浸润、角膜水肿和血管增生。部分菌株还可能产生过氧化氢等活性氧物质（ROS），进一步加剧组织损伤。值得注意的是，结膜支原体感染后可能并不总是引起明显症状，部分动物可成为无症状携带者，持续排菌，促进病原体在群体中的传播。

结膜支原体的检测通常结合微生物培养、分子生物学和血清学方法。传统培养需使用特殊培养基（如SP-4或改良Hayflick培养基），但由于生长缓慢（2-7天）且易受污染，现已较少单独使用。PCR技术因其高灵敏度和特异性成为常用方法，常用靶标包括16S rRNA基因、粘附素基因或特异性膜蛋白基因等。实时荧光定量PCR（qPCR）可进一步提高检测效率，并实现病原体载量分析。对于大规模筛查，ELISA可用于检测血清中的特异性抗体，但存在交叉反应可能。近年来，高通量测序（如宏基因组测序）也被用于野生动物或复杂样本中的病原体鉴定，但成本较高。在临床实践中，通常采用PCR结合眼部分泌物涂片镜检（吉姆萨染色）以提高诊断准确性。

探针法结膜支原体实时定量PCR试剂盒针对一个膜蛋白基因进行PCR鉴定，引物经BLAST验证为特异性靶向结膜支原体，与其他生物的基因组无交叉反应。通过检测亲缘关系较近的支原体和寄生于羊的其他微生物，证实本试剂盒对结膜支原体具有特异性，适用于结膜支原体的检测和鉴定。

本产品仅供研究使用。不可用于临床诊断。

 

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