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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 供应商:
上海谷研
- 检测范围:
25U/L800U/L
- 检测方法:
ELISA
- 应用:
1
- 适应物种:
详见说明书
- 标记物:
详见说明书
- 样本:
S6K
- 规格:
48T/96T
有效期:6个月
保存条件:2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断
标本处理
1. 本公司只对试剂盒本身负责,不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责,请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量,预留充足的样本。
2. 实验前应预测标本含量,如果标本浓度过高,应对标本进行稀释,使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中,建议进行预实验验证其有效性,并注意留存样本。
4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5. 若样本为细胞培养上清,因该类样本干扰因素较多,如:细胞状态、细胞数量、采样时间等,所以可能存在检测不出的情况。
6. 某些天然蛋白或重组蛋白,包括原核及真核重组蛋白,可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配,而不被检测出。
7. 建议使用新鲜样本,保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。
CST 4568S Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr980) (C14A11) Rabbit mAb 100 ul
CST 4569S Phospho-Cortactin (Tyr421) Antibody 100 ul
CST 4570S TNK1 (C44F9) Rabbit mAb 100 ul
CST 4572S Mcl-1 Antibody 100 ul
CST 45737S Phospho-PSD95 (Ser295) (A8F8Z) Rabbit mAb 100 ul
CST 4573S Cool2/αPix (C23D2) Rabbit mAb 100 ul
CST 4574S FGF Receptor 3 (C51F2) Rabbit mAb 100 ul
CST 4576S Lyn (5G2) Mouse mAb 100 ul
CST 4577S Phospho-FLT3 (Tyr842) (10A8) Rabbit mAb 100 ul
CST 4578S BACH1/BRIP1 Antibody 100 ul
CST 4579S Phospho-Mcl-1 (Ser159/Thr163) Antibody 100 ul
CST 4581S Phospho-Bim (Ser69) Antibody 100 ul
CST 45844S CRYAB (D6S9E) Rabbit mAb 100 ul
CST 45849S SDH5 (D1S8D) Rabbit mAb 100 ul
CST 4585S Phospho-Bim (Ser69) (D7E11) Rabbit mAb 100 ul
CST 4588S Ku70 (D10A7) Rabbit mAb 100 ul
植物核糖体S6K蛋白激酶ELISA检测试剂盒CST 4589S GATA-1 (D24E4) XP® Rabbit mAb 100 ul
CST 45901S DR3 (D5Q2R) Rabbit mAb 100 ul
CST 4590S Insulin Antibody 100 ul
CST 4591S GATA-1 Antibody 100 ul
CST 4592S Bik Antibody 100 ul
CST 4592T Bik Antibody 20 ul
CST 4593S C-Peptide Antibody 100 ul
CST 4594S Stat2 Antibody 100 ul
CST 45956S EPRS Antibody 100 ul
CST 4595S GATA-2 Antibody 100 ul
CST 4596S TRIF Antibody 100 ul
CST 4597S Stat2 Antibody (Mouse Specific) 100 ul
CST 45980S FTO (D2V1I) Rabbit mAb 100 ul
CST 4599S LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 100 ul
CST 4599T LC3A (D50G8) XP® Rabbit mAb 20 ul
CST 4600S Integrin α4 Antibody 100 ul
CST 4602S DNA-PKcs Antibody 100 ul
CST 4602T DNA-PKcs Antibody 20 ul
CST 4603S TrkB (80E3) Rabbit mAb 100 ul
CST 4603T TrkB (80E3) Rabbit mAb 20 ul
CST 4604S Doublecortin Antibody 100 ul
CST 4605S Phospho-Doublecortin (Ser297) Antibody 100 ul
CST 4606S TrkB Antibody 100 ul
CST 4607S TrkB (80G2) Rabbit mAb 100 ul
CST 46080S UNC1999 1 mg 样本处理及要求:
1. 血清:全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
2. 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本:1000g离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。
注:标本溶血会影响zui后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。
操作步骤:
1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。 6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟. 10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
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文献和实验书太大了,上传不了,需要的话我可以发到邮箱或者各位在网上载,assaydesigns公司网页就有。 licanming 怎么无人回啊?只好自己顶一下! zhidanguilai 检测PKC活性可以用加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性分析试剂盒,安全、快速、稳定,可用于筛选蛋白激酶C抑制剂或激活剂、定性定量分析纯化或部分纯化的PKC激酶活性。 测试盒原理: 基于ELISA的基本
测磷酸化水平 mengcb 还可以用PKC的 报告质粒检测FRET变化啊,也很经典的 bianbenjamin 放射性受体配体结合试验也是一个非常灵敏的测定PKC转位的方法,只是需要同位素标记的佛波酯,还是买的到的。我有这样一篇文献,需要的话上传给你。不过还是没有解决你的问题,你问的的确很深了,我也非常感兴趣这个问题,期待高人回答。 zhidanguilai 加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性分析试剂盒
所有PKC亚型了,那为什么还要分磷酸化不同的残基呢? 谢谢! zhidanguilai 加拿大Immunechem公司的非放射性蛋白激酶C活性分析试剂盒安全、快速、稳定,可用于筛选蛋白激酶C抑制剂或激活剂、定性定量分析纯化或部分纯化的PKC激酶活性。 测试盒原理: 基于ELISA的基本原理。PKC底物被包被在酶标板上,在ATP存在的前提下,PKC激酶将底物磷酸化,洗掉游离的PKC激酶和其他成分。再加入特异性磷酸化抗体(只识别
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