人流行性腮腺炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒

人流行性腮腺炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒本试剂盒用于体外定量检测血清、血浆、组织、细胞上清及相关液体样本中的含量。
有效期：6个月
保存条件：2-8℃
本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断
标本处理
1. 本公司只对试剂盒本身负责，不对因使用该试剂盒所造成的样本消耗负责，请使用者使用前充分考虑到样本的可能使用量，预留充足的样本。
2. 实验前应预测标本含量，如果标本浓度过高，应对标本进行稀释，使稀释后的标本符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。标本使用0.01mol/L的PBS稀释(PH=7.0-7.2)。
3. 若所检样本不包含在说明书所列样本之中，建议进行预实验验证其有效性，并注意留存样本。
4. 使用化学裂解液制备的组织匀浆或细胞提取液可能会由于某些化学物质的引入导致ELISA实验结果偏差。
5. 若样本为细胞培养上清，因该类样本干扰因素较多，如：细胞状态、细胞数量、采样时间等，所以可能存在检测不出的情况。
6. 某些天然蛋白或重组蛋白，包括原核及真核重组蛋白，可能因为与本产品所使用的检测抗体及捕获抗体不匹配，而不被检测出。
7. 建议使用新鲜样本，保存时间过长可能会存在蛋白降解或变性导致实验结果偏差。

6×Native PAGE DNA loading buffer    10×1ml 
6×RealSafe DNA loading buffer    2×1ml
6×TriColor DNA loading buffer(三染料)    10×1ml
6-苄氨基嘌呤溶液（6-BA）    5×1ml
Acrylamide/Bis 19:1 30%PAA Solution    100ml
Acrylamide/Bis 29:1 30%PAA Solution    100ml/500m
AEBSF 50×    
Ampicillin solution 氨苄青霉素溶液(100mg/ml)    ?5×1ml
Carboxy benzyl penicillin solution 羧苄青霉素溶液 500mg/ml    ?5×1ml
Cefotaxime Solution头孢噻肟钠/头孢霉素/噻孢霉素溶液(100mg/ml)    5×1ml
Chloramphenicol solution 氯霉素溶液34mg/ml    5×1ml 
DAPI染色液    5×1ml 
G418溶液50mg/ml    ?20ml
Gentamicin solution 庆大霉素溶液    5×1ml
Goldview染色液    1ml
Guanidine hydrochloride solution 6M 盐酸胍溶液    100ml
GUS染色试剂盒    50ml
IPTG溶液    5ml
Kanamycin solution 卡那霉素溶液 10mg/ml    5×1ml
Leupeptin 100×亮抑酶肽溶液    1ml 
Lysozyme solution 溶菌酶 5mg/ml    5×1ml
N6-异戊烯基腺嘌呤核苷溶液（2ip riboside）    5×1ml
人流行性腮腺炎病毒IgG抗体ELISA检测试剂盒N6-异戊烯基腺嘌呤溶液（2ip）    5×1ml
Neomycin solution 新霉素溶液    5×1ml
Penicillin G Na Solution 青霉素G钠盐溶液 50mg/ml    5×1ml 
Penicillin-Streptomycin Solution 100×青链霉素溶液    100ml
Penicillin-Streptomycin Solution 青链霉素溶液(100×)    100ml
Polymyxin B Solution多粘菌素B溶液 50mg/m    5×1ml 
PPA –植物组织培养抗菌保护剂    50ml 
Propidium Iodide Staining Solution 碘化丙啶染色液    1ml 
Proteinase K solution 蛋白酶K 20mg/ml    1ml/ 10×1ml 
Rifampicin solution 利福平溶液    5×1ml/10×1ml 
RIPA裂解液（强）    100 ml
RNaseA溶液    10×1ml 
RNase-free水/DEPC水    100ml /500ml
Spectinomycin solution 壮观霉素溶液    5×1ml
Streptomycin solution 链霉素溶液    5×1ml
TE 1× pH8.0    100ml /500ml 
TE 10× pH8.0    ?100ml /500ml 
Tetracycline solution 四环素溶液 50mg/ml    5×1ml/
Timentin溶液    5×1ml
Trypan Blue Staining Solution 台盼蓝染色液    ?50ml
Western及IP细胞裂解液    100 ml
X-gal溶液 20mg/ml    ?5ml
Zeocin 博来霉素    1ml
α-萘乙酸溶液（α-NAA）    5×1ml
赤霉素溶液(GA3)    5×1ml 
蛋白酶抑制剂Cocktail（片剂）    5×1ml
蛋白酶抑制剂混合物（100×，哺乳动物样品提取用）    1ml/5×1ml 
蛋白酶抑制剂混合物（100×，通用型）    1ml/5×1ml 
蛋白酶抑制剂混合物（100×，细菌抽提用）    1ml/5×1ml 
蛋白酶抑制剂混合物（100×，真菌或酵母抽提用）    
样本处理及要求:
1. 血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过一夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。zui后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响zui后检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。

操作步骤：
1. 标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在第一、第二孔中分别加标准品100μl，然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
2. 加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品最终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。
3. 温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。
5. 洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。 6. 加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。
7. 温育：操作同3。
8. 洗涤：操作同5。
9. 显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟. 10. 终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。 11. 测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。