FOR Mucin-like protein 1 ELISA

FOR Mucin-like protein 1 ELISA Kit实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

自备材料
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Glycerol-3-Phosphate Acyltransferase, Mitochondrial (GPAM)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
中间α-球蛋白抑制因子H4(ITIH4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Inter Alpha-Globulin Inhibitor H4 (ITIH4)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
无孢蛋白(ASPN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Asporin (ASPN)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PPARγC1α)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Peroxisome Proliferator Activated Receptor Gamma Coactivator 1 Alpha (PPARgC1a)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
Gremlin 1蛋白(GREM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Gremlin 1 (GREM1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
FOR Mucin-like protein 1 ELISA Kit游离三碘甲状腺原氨酸(fT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Free Triiodothyronine (fT3)    48T/96T    General
骺蛋白聚糖(EPYC)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Epiphycan (EPYC)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
生长激素2(GH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Growth Hormone 2 (GH2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
次黄嘌呤磷酸核糖基转移酶1(HPRT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase 1 (HPRT1)    48T/96T    Mus musculus (Mouse)
神经纤维网蛋白1(NRP1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Neuropilin 1 (NRP1)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
线粒体解偶联蛋白2(UCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Uncoupling Protein 2, Mitochondrial (UCP2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
保护素(CD59)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Protectin (CD59)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
吻素1(KISS1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Kisspeptin 1 (KISS1)    48T/96T    Rattus norvegicus (Rat)
胰高血糖素样肽2(GLP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Glucagon Like Peptide 2 (GLP2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Collagen Type I Alpha 1 (COL1a1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
Ⅺ型胶原α1(COL11α1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Collagen Type XI Alpha 1 (COL11a1)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
透明质酸结合蛋白2(HABP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Hyaluronan Binding Protein 2 (HABP2)    48T/96T    Homo sapiens (Human)
癌胚抗原相关细胞粘附分子7(CEACAM7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)    ELISA Kit for Carcinoembryonic Antigen Related Cell  操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。