FOR NF-kappa-B inhibitor alpha

FOR NF-kappa-B inhibitor alpha ELISA Kit实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中待测物质水平。用纯化的待测物质抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入待测物质，再与HRP标记的待测物质抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测物质呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中待测物质浓度。

自备材料
1）蒸馏水。
2）加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3）振荡器及磁力搅拌器等。
标本要求
1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
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人抗M2胆碱能受体抗体ELISA试剂盒    AMCRA    AMCRA    20ng/mL~640ng/mL    1
人线粒体肽蛋氨酸亚砜还原酶ELISA试剂盒    MSRA    Mitochondrial peptide methionine sulfoxide reductase    0.75ng/mL~24ng/mL    0.1
人微纤丝关联蛋白4ELISA试剂盒    MFAP4    Microfibrillar Associated Protein 4    0.625ng/mL~20ng/mL    0.1
人抗氨基甲酸化蛋白抗体ELISA试剂盒    CP-Ab    Anti-Carbamylation Protein Antibody    6.25ng/mL~200ng/mL    1
人1433蛋白ELISA试剂盒    1433PR        3.75ng/mL~120ng/mL    0.1
FOR NF-kappa-B inhibitor alpha ELISA Kit人登革热病毒抗体ELISA试剂盒    DV-Ab    Dengue virus antibody    0~    10
人莱克多巴胺ELISA试剂盒    RCT    Ractopamine    0.125ppb~4ppb    0.1
人腓骨蛋白2ELISA试剂盒    FBLN2    FBLN2    0.625ng/mL~20ng/mL    0.1
人血管内皮细胞生长因子受体ELISA试剂盒    VEGFR    Vascuoar endothelial cell growth factor receptor     0.625ng/mL~20ng/mL    0.1
人Kruppel样因子6ELISA试剂盒    KLF6    Kruppel Like Factor 6    0.375ng/mL~12ng/mL    0.1
人热休克蛋白65ELISA试剂盒    HSP-65    Heat Shock Protein 65    93.75pg/mL~3000pg/mL    10
人凋亡相关因子ELISA试剂盒    FAS;CD95    Factor-related Apoptosis    62.5pg/mL~2000pg/mL    10
人巨细胞病毒糖蛋白BELISA试剂盒    CMV gB    Cytomegalovirus Glycoprotein B    0.625ng/mL~20ng/mL    0.1
人α淀粉酶1ELISA试剂盒    AMS1    α-Amylase 1    12.5U/L~400U/L    1
人碱性唾液脯氨酸丰富蛋白3ELISA试剂盒    PRB3    Basic Salivary Proline Rich Protein 3    2.5ng/mL~80ng/mL    0.1
人酶原粒蛋白16同源物BELISA试剂盒    ZG16B    Zymogen Granule Protein 16 Homolog B    0.375ng/mL~12ng/mL    0.1
人白细胞弹性蛋白酶抑制因子ELISA试剂盒    LEI    操作步骤
1.标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
样品收集、处理及保存方法
1）血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2）血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3）细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4）组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液
5）保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70 ℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。

操作步骤
1）使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。
2）根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。
3）加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
5）每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。
7）每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。
8）取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。
9）在450nm波长处测定各孔的OD值。