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晶莱生物
- 服务名称:
脑梗MCAO(含再灌注)动物模型
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只
脑缺血在临床上具有较高的发病率和死亡率,严重危害中老年患者健康,寻找有明确疗效且作用机制清晰的预防和治疗脑梗死的药物是当前研究的前沿课题和热点领域。因此,脑缺血动物模型的制备在科学研究中具有重要意义。
MCAO 模型制备:
术前准备见左图,选择 220-250g 的 SD 大鼠,10% 水合氯醛(300uL/100g)麻醉保定,仰卧位,颈部正中剃毛消毒备用(右图)

剪开颈部皮肤,钝性分离颈部肌肉,暴露并游离单侧颈动脉,穿线备用。

动脉夹暂时夹闭主动脉,并结扎颈外动脉。主动脉用注射器针头挑开小口,插入自制线栓到颈内动脉,大约 2.5-3cm。结扎颈内动脉,结扎主动脉近心端,松开动脉夹。

逐层缝合,根据实验的需要的缺血时间进行拔栓手术(再灌注),拔栓时动物要完全麻醉,把出线栓的长度约为 0.5cm。
模型成功的评判方法
神经功能缺损(NDS)评分
0 分:活动基本正常,无明显神经病学症状;
1 分:左侧前爪无法完全伸展;
2 分:爬行时向左侧转圈;
3 分:行走时向偏瘫侧倾倒;
4 分:不能自动行走,有意识障碍
5 分:死亡
水迷宫实验
Morris 水迷宫(Morris water maze, MWM)实验是一种强迫实验动物(大鼠、小鼠)游泳,学习寻找隐藏在水中平台的一种实验,主要用于测试实验动物对空间位置感和方向感(空间定位)的学习记忆能力。(左图正常,右图模型)

TTC 染色
TTC 染色是常用来评价脑缺血损伤的指标,缺血区域会呈白色。

HE 染色
一般发生缺血损伤的脑组织的神经元细胞会受到明显损伤(上侧正常,下侧损伤)


TUNEL 染色
发生损伤的脑组织,TUNEL 染色的细胞会明显增多。

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文献和实验一、技术简介: 脑出血(cerebral hemorrhage)是指非外伤性脑实质内血管破裂引起的出血,占全部脑卒中的20%~30%,急性期病死率为30%~40%。目前实验造模的方法主要有脑立体定位注射自体血或者胶原酶,我公司有多年脑出血造模经验,可以满足实验要求。 脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemia-reperfusion injury)是指脑缺血致脑细胞损伤,恢复血液再灌注后,其缺血性损伤反而进一步加重的现象。建立理想的脑缺血再灌注损伤动物模型是脑血管病研究的基础
ICA后进入MCA。4.大脑中动脉(MCOA)局灶性卒中模型的建立方法包括外科机械性闭塞模型、线栓法及光化学方法等。由内皮素-10.1 nmol/μl建立的土拔鼠MCA闭塞及再灌注模型,与人类的发病机制比较接近,是第一个利用生物因素制成的MCA闭塞及再灌注模型。5.插线法Koizumi于日本卒中会议(1985)首次报道了可逆性MCAO模型,解决了大鼠局灶脑缺血再灌流损伤研究的难题。分离暴露颈部血管,从ECA或CCA分叉处插入4~0尼龙线,进入ICA,阻断MCA起始端及其所有侧支血液供应,导致MCA
一个脑缺血动物模型的成功建立,对于临床前心脑血管药理的研究具有重要意义。一个理想的脑缺血及再灌流动物模型应具备以下条件:(1)血管闭塞后能引起相应区域血流量改变。(2)病理改变接近人脑急性缺血性变化。(3)大脑缺血严重,但脑干活动尚能维持,有利于缺血再灌流的连续观察。(4)闭塞动脉的方法能进行重灌注。(5)重复性好。(6)可控制缺血的时间,制成轻重不等的缺血模型。常用方法:1.开颅法:多数选择颞下部开颅,分离并电凝横过嗅束外缘或内缘处的MCA或用丝线结扎MCA造成脑梗塞,是目前公认的标准
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