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鹿森生物
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文献和实验RNA 抽提比基因组 DNA 抽提要困难得多。事实上,现有的 RNA 抽提方法/试剂,如果用于从培养细胞中抽提 RNA,比抽提基因组 DNA 更方便,成功率也更高。那为什么同样的方法用于组织 RNA 的抽提,总会碰到问题呢? RNase 真的很顽固吗? 刚涉及 RNA 抽提的新手都会听到别人说 RNase 很顽固,用高压灭菌都无法去除其活性。于是在配制 Tris 缓冲液时就遇到了两难的境地。Tris 缓冲液不能用 DEPC 处理,只能用 DEPC 处理过的水配制
本制品是一种快速方便的总RNA提取试剂,可以从动物组织、植物材料、各种微生物、培养细胞等中提取总RNA。样品在RNAiso Reagent中能够充分被裂解,在加入氯仿离心后,溶液会形成上清层、中间层和有机层(下层),RNA分布在上清层中,收集上清层后,经异丙醇沉淀便可以回收得到总RNA。RNAiso Reagent具有很强的广谱性,可以适用于各种样品的总RNA提取,提取过程方便快速,整个操作在一小时内便可以完成。经本制品提取的总RNA纯度高,基本不含蛋白质及基因组 DNA,提取的RNA可以直接
/L KAc,混匀,置冰上20-30 min。4 4℃,15 000rpm离心15min,转移上清到另一离心管中,加入0.7V的异丙醇,混匀,-20℃沉淀30 min 。5 12 000rpm离心10min回收基因组DNA沉淀,吹干后加入适量的灭菌ddH2O或TE溶解DNA。6 加入1/10体积的RNaseA,37℃保温20min,除去RNA。7 CI抽提后,加2V乙醇,-20℃沉淀30 min 。12 000rpm离心10min回收基因组DNA沉淀。8 用400μL 70%乙醇洗一次后,吹干
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