DAB显色试剂盒（20×）

免疫组化染色方法及常用抗原修复方法

。6）滴加正常山羊血清封闭液，室温20分钟。甩去多余液体。7）滴加 Ⅰ 抗,室温1小时或者4℃过夜或者37℃1小时（4℃过夜后在37℃复温45分钟）。8）PBS洗三次每次2分钟。9）滴加生物素化二抗,20℃～37℃ 20 分钟。10）PBC 洗 3 次每次 2 分钟。11）滴加试剂SABC，20℃～37℃ 20 分钟。12）PBS 洗 4 次每次 5 分钟。13）DAB 显色：DAB 显色试剂盒或者自配显色剂显色（镜下掌握显色程度）。14）蒸馏水洗。苏木素复染 2 分钟、盐酸酒精分化。15）脱水、透明

Western 实验步骤

梯度（两个孔）取其平均值减去空白后制作标准曲线得到曲线公式。测得的样品的 OD 值（三个孔）取其平均值按标准曲线的公式运算得到蛋白浓度，按 50 μg/上样孔的标准来计算上样量，算法为：上样量= 50/蛋白浓度。注：所有得到的 OD 值必须减去背景（标曲中空白孔的 OD 值）后再计算。 样品处理： 蛋白样品：5×SDS 上样缓冲液按照 4：1 比例混合沸水浴 10 min 左右。浓度过高的样品可用 PBS 稀释后再煮样。样品煮好后 -20 ℃ 保存待用（可保存半年），样品长期保存须置于 -70

三生三世，一场组化，一次豪赌

3A7)XP® Rabbit mAb#9145 检测 p-Stat3 的表达，使用不同的产品进行显色。与竞争者的 DAB 产生的信号相比，SignalStain® DABSubstrateKit 的显色强度更佳。CST 对实验细节进行了步步优化，抗体说明书也是为实验成功保驾护航的必备指南：注：使用 PLK1(208 G4)Rabbit mAb #4513 检测人结肠肿瘤中 PLK1 的表达，在经过辅助试剂的步步优化后发现，使用一抗稀释液#8112 稀释抗体，聚合物型二抗#8114 进行检测，DAB 显色试剂