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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 细胞类型:
真核细胞
- 物种来源:
犬
- 细胞形态:
上皮样
- 英文名:
sf9
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文献和实验市场上供应的大多数培养液的配方非常接近,这使得细胞很容易适应新的培养液。这里我将详细介绍一个方法,这个方法是保守的,在大多数情况下可以进行删减一些步骤。最简单最节省时间的情况是把细胞直接分装到新的培养液中,观察几代以保证细胞的生长参数是可以接受的。这个方法适于悬浮细胞,不过也很容易扩展到贴壁细胞。 细胞的生长参数 1.翻倍时间(Doubling Time) 细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞
细胞。 细胞的生长参数 1 .翻倍时间( Doubling Time ) 细胞的翻倍时间在评价昆虫细胞健康程度的参数中是最容易测量的。翻倍时间应该在细胞处于对数期复制时测量,对于 Sf9 和 Sf21 细胞来说通常是介于 16-24 小时之间,不过大多数在 20-22 小时。 dt=t × ln2/ln(Ct/Co) ,其中 dt 为翻倍时间, Co 为起始细胞数目, Ct 为经过时间 t 后的细胞数目, t 为 Co 和 Ct 两次计数之间的间隔时间,所有的时间都以小时为单位
试验之前要先使你的细胞株分别适应不同的培养液,否则试验结果不具有代表性。 注意:为了优化表达,你必须了解你的细胞的生长参数;为了方便新手,我将列出一些生长参数通常的值。我最喜欢的Sf9细胞株可以最低以2×105细胞/ml的浓度分装,并且恢复几乎没有滞后期。在对数期,20个小时细胞数目就可以翻倍,浓度最高可以达到5×106细胞/ml。下面的实验步骤将以上面列出的生长参数为前提。如果你的细胞株生长参数有所不同,你需要对实验步骤做出合适的调整。 低MOI感染简介 低MOI(Multiplicity
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