ADPG焦磷酸化酶（AGP)检测试剂盒|紫外分光光度法|AD

ADPG焦磷酸化酶（AGP)检测试剂盒|紫外分光光度法|ADPG焦磷酸化酶（AGP)测试盒，ADPG焦磷酸化酶（AGP)检测试剂盒|紫外分光光度法|ADPG焦磷酸化酶（AGP)测试盒，货号：YT6034，品牌：伊塔生物，规格：25管/24样，单位：盒

测定意义 
AGP (EC 2.7.7.21)主要存在于植物中，催化葡萄糖-1-磷酸与ATP反应生成淀粉合成的直接
前体ADPG，是植物淀粉生物合成的主要限速步骤。 
测定原理 
AGP催化的逆向反应生成G1P，在反应体系中添加的磷酸己糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢
酶依次催化生成6-磷酸葡萄糖酸和NADPH，340nm下测定NADPH增加速率，即可计算
AGP活性。 
需自备的的仪器和用品 
紫外分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL石英比色皿、研钵、冰和蒸
馏水 
试剂的组成和配制 
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存; 
试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存； 
试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入9mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂分装
后-20℃保存，禁止反复冻融； 
试剂三：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水充分溶解备用；用不完的试剂分装
后-20℃保存，禁止反复冻融； 
粗酶液制备  
按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL
提取液），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。 
测定步骤 
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。 
2、试剂一置30℃保温10min以上。 
3、在EP管中按顺序加入下列试剂

AGP活性计算 
1、按样本蛋白蛋白浓度计算 
单位的定义：每mg组织蛋白每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活性单位。 
AGP（nmol/min/mg prot）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷(V样×Cpr) ÷T×稀释倍数 
=2813×ΔA÷Cpr 
此法需要自行测定样本蛋白质浓度。 
2、按照样本鲜重计算 
单位的定义：每g组织每分钟催化产生1nmol NADPH定义为一个酶活力单位。 
AGP（nmol/min /g 鲜重）＝[ΔA×V反总÷（ε×d）×109]÷（W× V样÷V样总）÷T×稀释倍数 
=2813×ΔA÷W 
V反总：反应体系总体积，1×10-3 L；ε：NADPH摩尔消光系数，6.22×103 L / mol /cm；d：
比色皿光径，1cm；V样：加入样本体积，0.04mL；V样总：加入提取液体积，1 mL；T：
反应时间，2 min；稀释倍数：1.4；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量。