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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
室温,12个月
- 保质期:
12个月
- 供应商:
谷研
- 规格:
10ml
①实验用品:托盘天平、量筒、胶头滴管、烧杯、玻璃棒、药匙等。
②实验步骤:计算→称量药品→量取溶剂水→搅拌溶解配制溶液的实验步骤:
具体步骤为:
1.利用公式计算所需溶质和水的质量。其中:溶质的质量=溶液质量×溶质的质量分数,溶液质量=溶液体积×溶液密度,溶剂的质量=溶液质量-溶质的质量;由于溶剂一般是水,且密度为1g/cm3,所以溶剂的体积和质量在数值是相等的。
2.用托盘天平称量所需溶质,包含称取溶质的质量和量取溶剂的体积;首先用托盘天平(配用药匙)称量所需的溶质,倒入烧杯中;然后用量筒(配用胶头滴管)量取所需的水,倒入盛有溶质的烧杯中。
3.把水的密度近似看作1g/cm3,用量筒量取一定体积的水,倒入盛有溶质的烧杯里,用玻璃棒搅拌,使溶质溶解。
4.把配好的溶液装入试剂瓶中,盖好瓶塞并贴上标签(标签中应包括药品的名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中(注意标签向外)。
【溶液配制过程中的注意事项】
1.容量瓶是刻度精密的玻璃仪器,不能用来溶解
2.溶解完溶质后的溶液需要冷却到常温再转移
3.溶解过程中的烧杯以及搅拌、引流用的玻璃棒都需要在转移后洗涤两三次。
4.把小烧杯中的溶液往容量瓶中转移时,需要借助玻璃棒引流,因容量瓶瓶口较细,目的是避免溶液洒出。
5.定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切,眼睛需与凹液面底部持平,否则就会导致读数偏大或者偏小。
6.如发现定容时溶剂水的体积过大,则实验失败。切勿使用胶头滴管洗去多余水量。
7.摇匀后,如果再次观察发现读数偏低,不做任何处理。继续加入蒸馏水时将导致溶质质量分数偏低。
配制溶液分三种情况:
第一情况是用固体配制溶液;
第二情况是用液体配制溶液;
第三情况是用气体配制溶液.
初中只需掌握前两种溶液的配制.
例1、配制100克质量分数为10%的氯化钠溶液的实验步骤:
1、计算
配制100克质量分数为10%的氯化钠溶液
所需氯化钠的质量=100g*10%=10克,
所需水的质量=100g-10g=90g,所需水的体积=90g/(1g/ml)=90ml
2、称量
用托盘天平称量10克的氯化钠,倒入烧杯中.
3、溶解
用量筒量取90毫升的水,倒入盛有氯化钠的烧杯里,用玻璃棒搅拌,使氯化钠溶解.
4、贴标签贮存
把配好的溶液装入试剂瓶并贴上标签(标签中应包括药品名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中
例2:用质量分数98%的浓硫酸(p=1.84g/ml)配制500克质量分数为20%的稀硫酸的实验步骤:
1、计算
配制500克质量分数为20%的稀硫酸需要浓硫酸的质量=(500g*20%)/98%=102g
需要浓硫酸的体积=102g/1.84g/ml=55.4ml
所需水的质量=500g-102g=398g
所需水的体积=398g/(1g/ml)=398ml
2、量取(此步与固体配制溶液不同)
用量筒量取398ml水,倒入烧杯中.
3、稀释 (此步与固体配制溶液也不同)
用量筒量取55.4毫升的浓硫酸,沿烧杯壁慢慢注入水中,并不断用玻璃棒搅拌,使产生的热量迅速扩散.
4、贴标签贮存
把配好的溶液冷却后装入试剂瓶并贴上标签(标签中应包括药品名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中
甘油PBS封片剂【配制溶液的步骤】
①实验用品:托盘天平、量筒、胶头滴管、烧杯、玻璃棒、药匙等。
②实验步骤:计算→称量药品→量取溶剂水→搅拌溶解配制溶液的实验步骤:
具体步骤为:
1.利用公式计算所需溶质和水的质量。其中:溶质的质量=溶液质量×溶质的质量分数,溶液质量=溶液体积×溶液密度,溶剂的质量=溶液质量-溶质的质量;由于溶剂一般是水,且密度为1g/cm3,所以溶剂的体积和质量在数值是相等的。
2.用托盘天平称量所需溶质,包含称取溶质的质量和量取溶剂的体积;首先用托盘天平(配用药匙)称量所需的溶质,倒入烧杯中;然后用量筒(配用胶头滴管)量取所需的水,倒入盛有溶质的烧杯中。
3.把水的密度近似看作1g/cm3,用量筒量取一定体积的水,倒入盛有溶质的烧杯里,用玻璃棒搅拌,使溶质溶解。
4.把配好的溶液装入试剂瓶中,盖好瓶塞并贴上标签(标签中应包括药品的名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中(注意标签向外)。
【溶液配制过程中的注意事项】
1.容量瓶是刻度精密的玻璃仪器,不能用来溶解
2.溶解完溶质后的溶液需要冷却到常温再转移
3.溶解过程中的烧杯以及搅拌、引流用的玻璃棒都需要在转移后洗涤两三次。
4.把小烧杯中的溶液往容量瓶中转移时,需要借助玻璃棒引流,因容量瓶瓶口较细,目的是避免溶液洒出。
5.定容时要注意溶液凹液面的最低处和刻度线相切,眼睛需与凹液面底部持平,否则就会导致读数偏大或者偏小。
6.如发现定容时溶剂水的体积过大,则实验失败。切勿使用胶头滴管洗去多余水量。
7.摇匀后,如果再次观察发现读数偏低,不做任何处理。继续加入蒸馏水时将导致溶质质量分数偏低。
配制溶液分三种情况:
第一情况是用固体配制溶液;
第二情况是用液体配制溶液;
第三情况是用气体配制溶液.
初中只需掌握前两种溶液的配制.
例1、配制100克质量分数为10%的氯化钠溶液的实验步骤:
1、计算
配制100克质量分数为10%的氯化钠溶液
所需氯化钠的质量=100g*10%=10克,
所需水的质量=100g-10g=90g,所需水的体积=90g/(1g/ml)=90ml
2、称量
用托盘天平称量10克的氯化钠,倒入烧杯中.
3、溶解
用量筒量取90毫升的水,倒入盛有氯化钠的烧杯里,用玻璃棒搅拌,使氯化钠溶解.
4、贴标签贮存
把配好的溶液装入试剂瓶并贴上标签(标签中应包括药品名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中
例2:用质量分数98%的浓硫酸(p=1.84g/ml)配制500克质量分数为20%的稀硫酸的实验步骤:
1、计算
配制500克质量分数为20%的稀硫酸需要浓硫酸的质量=(500g*20%)/98%=102g
需要浓硫酸的体积=102g/1.84g/ml=55.4ml
所需水的质量=500g-102g=398g
所需水的体积=398g/(1g/ml)=398ml
2、量取(此步与固体配制溶液不同)
用量筒量取398ml水,倒入烧杯中.
3、稀释 (此步与固体配制溶液也不同)
用量筒量取55.4毫升的浓硫酸,沿烧杯壁慢慢注入水中,并不断用玻璃棒搅拌,使产生的热量迅速扩散.
4、贴标签贮存
把配好的溶液冷却后装入试剂瓶并贴上标签(标签中应包括药品名称和溶液中溶质的质量分数),放到试剂柜中
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文献和实验一、免疫荧光技术中标本制作的基本程序近似于酶免疫组化,不同点如下: 1、免疫荧光不需要使用双氧水处理,封闭和一抗孵育与其相同。 2、免疫荧光的二抗使用不同荧光标记的二抗孵育,孵育时间根据抗体的工作浓度确定。 3、二抗孵育之后充分洗片后即可贴片、封片和观察。 4、免疫荧光在封片时常使用专用封片剂或甘油:0.01M PBS (1:1)。条件许可,建议购买抗淬灭的封片液,使标本可以保存更久。 5、荧光抗体的孵育以及后续处理需要避光。 6、荧光抗体染色假阳性可能会多,需要分别设定阳性和阴性
免疫荧光(Immunofluorescence, IF)实验方法
光抗体,因此必须谨记避光操作,此外抗体浓度的选择可能更加关键。最后需要注意的是,标记好荧光的细胞片应尽早观察,或者用封片剂封片后在4℃或-20℃避光保存,以免因标记蛋白解离或荧光减弱而影响实验结果。 由于操作步骤比较多,同时在分析结果时无法像WB那样可以根据分子量的大小区分非特异性识别,所以要得到一个完美的免疫荧光实验结果,除了需要高质量的抗体,以及对实验条件进行反复优化外,还必须设立严谨的实验对照。总之,免疫荧光实验从细胞样品处理、固定、封闭、抗体孵育到最后的封片及观察拍照,每步都非常关键
1.细胞爬片;2.4%多聚甲醛固定10min(固定细胞器用预冷的70%甲醇+30%丙酮);3.PBS漂洗5min;4.0.5% Triton 穿孔15min(丙酮固定法不用透化处理);5.PBS漂洗2次,每次5min;6.1%BSA封闭30min;7.加入1%BSA稀释的一抗,于37℃杂交2h;8.PBS漂洗2次,每次5min;9.加入1%BSA稀释的二抗,于37℃杂交1h;10.PBS漂洗2次,每次5min;11.5ug/ml DAPI染色2min;12.抗淬灭封片剂封片。抗淬灭封片剂
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