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4℃
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6个月
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YXSW
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现货,有折扣
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浙江羽翔生物科技有限公司
- 规格:
50ml/100ml
| 规格: | 50ml | 产品价格: | ¥70.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 100ml | 产品价格: | ¥100.0 |
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文献和实验台面上,四角用水浸湿以使保鲜膜保持平整;将抗体溶液加到保鲜膜上;从封闭液中取出膜,用滤纸吸去残留液后,将膜蛋白面朝下放于抗体液面上,掀动膜四角以赶出残留气泡;室温下孵育 1~2 h 后,用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次,每次 10 min;再用 TBS 洗一次,10 min。 3. 同上方法准备二抗稀释液并与膜接触,室温下孵育 1~2 h 后,用 TBST 在室温下脱色摇床上洗两次,每次 10 min;再用 TBS 洗一次,10 min,进行化学
BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线:用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线,具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品,每个浓度(0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA,其余用 PBS 补齐至 20 μL)梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度:10 倍稀释法:取 18 μLPBS+2 μL 样品上清(经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
2 hrs,或4 ℃ 过夜。封闭完用TBST 冲洗5 sec。用吸水纸吸去残余液。 II 一抗孵育:按照一抗说明书的推荐比例稀释一抗,使用TBST 或封闭液稀释。在一容器中,将PVDF 膜浸没在抗体溶液里,室温下2 hrs 或4 ℃ 过夜,摇床缓慢摇匀。 III 一抗孵育完后,用TBST 室温下在摇床上洗3 次,每次10 min。 IV 二抗孵育:同上方法准备二抗稀释液并与膜接触,室温下摇床缓慢摇匀1 -2 hrs。 V 二抗孵育完后,用TBST 室温下在摇床上洗3 次,每次10 min
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