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植物(Plant)伏马毒素B1(FB1)ELISA检测试剂盒

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  • ¥2
  • 仕诺达
  • 最低检测浓度小于1.0 ng/mL。
  • SND-Pl063
  • 安徽
  • 2026年01月04日
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    • 详细信息
    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 供应商

      仕诺达生物

    • 库存

      999

    • 样本

      植物

    • 标记物

      伏马毒素B1

    • 适应物种

      植物

    • 应用

      高校,中科院,研发单位

    • 检测方法

      ELISA

    • 检测范围

      最低检测浓度小于1.0 ng/mL。

    • 规格

      48T/96T

    规格:48T产品价格:询价
    规格:96T产品价格:¥2.0
    植物(Plant)伏马毒素B1FB1ELISA检测试剂盒
    使用说明书
    检测原理
    试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包伏马毒素B1FB1)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的竞争抗原,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的伏马毒素B1FB1)呈负相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
    样品收集、处理及保存方法
    1.  样本不能含叠氮na(NaN3),因为叠氮na(NaN3)是辣根过氧化物酶(HRP)的抑制剂。
    2.  标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行。
    3.  植物萃取液或其它相关样本:请1000 x g离心20分钟,取上清即可检测。
    4.  保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
    自备物品
    1. 酶标仪(450nm)
    2. 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
    3. 37℃恒温箱产品细节图片1
    操作注意事项
    1.   试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
    2.   实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
    3.   按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
    4.   严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
    5.   所有液体组分使用前充分摇匀。
    试剂盒组成
    名称 96孔配置 48孔配置 备注
    微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条
    标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管
    样本稀释液 6mL 3mL
    竞争抗原-HRP 6mL 3mL
    20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
    底物A 6mL 3mL
    底物B 6mL 3mL
    终止液 6mL 3mL
    封板膜 2张 2张
    说明书 1份 1份
    自封袋 1个 1个
    注:标准品(S0-S5)浓度依次为:0、5、10、20、40、80 ng/mL
    试剂的准备
     20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加19份的蒸馏水。
    洗板方法
    1.   手工洗板:甩尽孔内液体,每孔加满洗涤液,静置1min后甩尽孔内液体,在吸水纸上拍干,如此洗板5次。
    2.   自动洗板机:每孔注入洗液350μL,浸泡1min,洗板5次。
    操作步骤产品细节图片2
    1.   从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
    2.   设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
    3.   样本孔先加待测样本10μL,再加样本稀释液40μL;空白孔不加。
    4.   除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的竞争抗原50μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
    5.   弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液,静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。
    6.   每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
    7.   每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
    结果判断产品细节图片3产品细节图片4
    1.  15分钟内在波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值;
    2.  百分结合率计算:设S0管计数为B0,各标准管或样品管计数为B,非特异管计数为NSB,则百分结合率计算公式如下:B/B0=(B-NSB)/(B0-NSB)×100%
    3.  logit计算:各标准点或样品管的logit值计算公式如下:logit=ln(B/B0)/(1-B/B0)
    4.  将标准品的OD均值与标准品0点的OD均相除,为标准点的百分结合率,在log-logit坐标纸上绘图。
    5.  Log-logit双对数标准曲线:坐标纸上横轴从左至右第一个1-9表示为第一个10进位,第二个1-9表示为第二个10进位。第三个1-9表示为第三个10进位。坐标纸纵轴为百分比(1-99),即各标准吸光值的百分结合率。取一条通过各点的直线。要求尽可能多的点在线上,同时剩余的点均匀分布在直线的两边。样品也同样由吸光值计算百分结合率,再从纵轴上的相应结合率找到直线上的点,此点对应的横坐标浓度即为样品的浓度,无须换算。
    6.  人工处理:以标准浓度取log值为横坐标,对应的logit值为纵坐标在普通坐标纸上或以标准浓度为横坐标,对应的B/B0为纵坐标在logit-log坐标纸上画出标准曲线(理想化时是一条直线)。根据待测样
    品的B/B0可以从坐标纸上查出样品的浓度值。如果使用普通坐标纸,查出的数值应取反对数才是最后的浓度值。
    7.  自动处理:使用logit-log或四参数数据处理模式,由电脑自动计算得出结果。
    8.  敏感度:1.0 ng/ml
    9.  图例

    试剂盒性能
    1.  准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
    2.  灵敏度:最低检测浓度小于1.0 ng/mL。
    3.  特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
    4.  重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
    5.  贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
    6.  有效期:6个月
    免责声明
    1.   试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或人体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担,本公司概不负责。
    2.   严格按照说明书操作,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。

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