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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 供应商:
上海西格
- 库存:
56
- 样本:
体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等等
- 标记物:
详见说明书
- 适应物种:
大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物
- 应用:
ELISA检测
- 检测方法:
详见说明书
- 检测范围:
用于检测血浆,血清及相关液体等样本
- 规格:
48T/96T
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
产品名称:人盐酸多巴胺ELISA检测试剂盒价格
英文名称:3-Hydroxytyramine hydrochloride
检测范围:0.3125ng/mL~10ng/mL
灵敏度:0.1
规格:96T/48T
保存;2-8℃。
检测目的:用于检测血浆,血清及相关液体等样本。例如灌洗液、脑脊液、血清、血浆、尿液、胸腹水、细胞培养上清、组织匀浆等标本.
检测种属:大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、人、等动植物。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。众所周知,酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
操作流程:
(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,最终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。产品仅用于科研
NCI-H1703(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2洛莫司汀质量规格:>98%,BRLomustine
BHK-21(仓鼠肾细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-M022小鼠甲状腺上皮细胞完全培养基100mL 人B细胞瘤细胞;RAMOS洛莫司汀(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Lomustine
CM-H006人肺动脉成纤维细胞完全培养基100mL苯氧乙酸(标准品)质量规格:分析标准品Phenoxyacetic acid
WARS Others Human 人 WARS / pRS 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 菲(标准品)质量规格:分析标准品,用于环境分析Phenanthrene
原代上皮细胞特制基础培养基Many types of cells包装:500/250/100ml芘(标准品)质量规格:分析标准品Pyrene
VCaP(人前列腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7苯丙氨酯(标准品)质量规格:含量测定Phenprobamate
人真皮成纤维细胞-胎儿裂解物HDF-f L哈西奈德(标准品)质量规格:含量测定Halcinonide
PRNP Others Human 人 PRNP / Prion 人细胞裂解液 (阳性对照) 氯化胆碱(标准品)质量规格:TLC法检查Choline chloride
人急性T细胞性白血病细胞;I 2.1(CRL-2572)灵芝酸G(标准品)质量规格:HPLC≥98%,标准品Ganoderic acid G
tTA基因修饰的小鼠畸胎瘤细胞(B类);P19-CAG-tTA-3C8 透明质酸酶(含10mL酶解缓冲液) 1mL6α-甲基21-醋酸盐质量规格:美国进口6α-Methylprednisolone 21-Acetate
EB病毒转化的人B细胞;KMY0911食用色素亮蓝,英文名或英文缩写:Erioglaucine diwo7ium salt,级别:BS,84%,规格:5克
THY1 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD90 / THY-1 人细胞裂解液 (阳性对照) 缩二脲;安基酰脲;安缩脲;二缩脲 Biurqt;cllophcMic ccid cMidq;CcrbcMylurqc;IMidodiccrbonic dicMidq 108-19-0
CM-H074人尿道上皮细胞完全培养基100mL四羟酮醇S,英文名或英文缩写:Thioflavine S,级别:BR,470/570NM,规格:25克
CCC-HIE-2细胞,人胚胎肠粘膜细胞 人成骨肉瘤细胞,MG-63细胞 人胚肺成纤维细胞;IMR-90微量可调移液器P101克保存:-20℃
F81(猫肾细胞) 5×106cells/瓶×2(聚酮)
人盐酸多巴胺ELISA检测试剂盒价格大鼠肾小球系膜细胞hbzy-1 Rat mesangial cell hbzy-1 DMEM(高糖)+10%FBS(或者EMEM+10%FBS)羟甲基达沙替尼Hydroxymethyl Dasatinib质量规格:美国进口
NRG1 Protein Human 重组人 NRG1-beta 1 蛋白 (ECD, Fc 标签)N-去羟乙基达沙替尼-d8N-Deshydroxyethyl Dasatinib质量规格:美国进口
NCI-H1975(人肺腺癌细胞) 5×106cells/瓶×2 神经元细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)4'-羟基达沙替尼4'-Hydroxy Dasatinib质量规格:美国进口
少突胶质前体细胞分化培养基OPCDM14-氯柔红霉素14-Chloro Daunorubicin质量规格:美国进口
PIANP Others Human 人 C12orf53 人细胞裂解液 (阳性对照) 多1紫杉醇代谢物M4Docetaxel Metabolite M4质量规格:美国进口
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文献和实验时样本之间干扰。 Q:说明书上写细胞量为 1~5 × 105 ,细胞量多的话对检测结果有没有影响? A:建议细胞量最多不要超过 106个,过量的细胞相当于染料被稀释,影响染色和分离效果。一般 2×105 个细胞足够进行凋亡检测了,通常情况下检测 10,000 个细胞就能得到比较好的结果。 Q:是否可以用 PBS 替代凋亡试剂盒里面的 Binding Buffer? A:不行,Binding Buffer 是必须要加的,Annexin V 与 PS 的结合依赖 Ca2+,Binding
化作用——氧分子、过氧化氢、氧自由基 5. 表面活性剂和去污剂 6.变性剂——脲和盐酸胍、高浓度盐、螯合、有机溶剂 7. 重金属离子和巯基试剂 8. 热 9. 机械力 10. 冷冻和脱水 11. 辐射 5. 酶活计算 ① 酶活定义 酶的活力单位:酶的1个活力单位是在该酶的最适条件下,在25℃、1 min内催 1μmol的底物转化为产物的酶量。 ② 定时法的计算 将酶与底物在特定条件下孵育,酶促反应开始进行,经过一定时间后,用终止液终止反应,通过化学或生物化学的方法测出底物或产物的总变化量,除以时间即可
针对同一指标,生化试剂盒和 ELISA 试剂盒的检测结果趋势是一致的吗?
一、两种方法检测原理 两种方法的基本原理都是朗伯-比尔定律,但是具体形成过程和检测的方法不一样的。 1) 生化试剂盒检测原理 生化试剂盒检测的本质就是某物质化学变化的显色反应,其反应过程可以划分为四个区:延迟区、等速区、过渡区和平衡区,以时间为横坐标、吸光度为纵坐标作图,如下所示: 延迟区:无规律可寻。 等速区:对应的是速率法,一般应用于酶活力的检测。 过渡区:对应的是固定时间法,目的是解决某些化学反应的非特异性问题,提高准确度。 平衡区:对应的是终点法,主要是测定某物质在样本中的含量。 目前
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