gibco特约代理商|12604-013 TRYPLE EX

类器官培养与应用——卵巢癌类器官

（依此类推）。 15、将收集的类器官转移到 5 ml Eppendorf 管中并放在冰上，4℃ 条件下 220g 离心 5min。 16、去除离心上清，并添加 37℃ 预热的 TrypLE Express（含 10μM Y27632）。轻轻旋转 Eppendorf 管，使类器官与 TrypLEExpress 混合均匀。 17、37℃ 条件下将类器官与 TrypLE 孵育 10min（致密型类器官）或 5min（低粘性和囊性类器官）。 18、加入 500μl 预冷的 DMEM/F12 终止消化，4℃

PriCells: 利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞

利用Hoechst 33342外流性质分选原代角膜间质干细胞 试剂和材料： 1. 2—4代的间质细胞； 2. HBSS/2FB； 3. Hoechst 33342染料，1mg/ml水溶； 4. 碘化丙啶（PI），2mg/ml水溶； 5. 维拉帕米，500μg/ml水溶； 6. DEME/2FB； 7. 胰蛋白酶/TrypLE：TrypLE Express或0.25%胰蛋白酶，溶于CMF-Saline G； 8. MoFlo（或与其类似的）高速细胞分选仪，具备350nm激发能力

类器官培养与应用——心脏类器官

0.1%（w/v）的明胶，室温静置 15min 至明胶凝固。 2、在明胶上接种丝裂霉素处理过的 MEFs 细胞悬浮液，细胞数约为 1.8×106个。放置在 7℃，5%CO2 的培养箱中培养至细胞汇合度 70-80% 时进行传代。 3、吸去 MEFs 培养基，将 ESCs 接种于明胶上，添加 10ml ESCs 培养基，放置在 37℃，5%CO2 的培养箱中培养 3-5 天。 4、向 hESCs 中加入 1ml TrypLE Express，并将培养皿放置在 37℃ 条件下进行解离，直到所有的细胞都以小细胞