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【原创】山寨Stratagene“QuikChange Site-Directed Mutagenesis Kits”实验方案

。 7. 从每个平板上挑取6个克隆，提取质粒并进行酶切分析。鉴定无误后送交测序。 附件即为所引用的文献 实验中所用试剂： 1. PrimeSTARTM HS DNA polymerase，Takara，购自本地代理商 2. Dpn I ，Fermentas，购自上海生工 3. Cycle-pure Kit，Omega，购自本地代理商 4. 自制电感受态 5. MicroPulser Electroporation Apparatus（电转化仪），美国Bio

献给初学者：如何在细胞中稳定表达基因

作为细胞生物学专业的博士生，在基因功能研究上已经有五年的经验了，今天我给大家讲讲其中经常用到并且非常重要的一种技术--慢病毒包装的过表达体系。下面我就从引物设计，慢病毒表达质粒构建等方面详细讲述。下面以 plex-MCS 载体为例。1. 选择酶切位点，为了避免移码突变，上游的酶切位点选择起始密码子 ATG 前面的 spel，下游选择 xho1。2. 构建方法的选择。连接法对于连接法，首先设计引物将目的基因 PCR 出来，即酶切位点加基因引物，此时应注意，为了防止酶切将基因破坏，通常习惯在两端

【求助】质粒双酶切电泳图长成这样切胶纯化后能做连接吗

dengjie19841217 大家能不能帮我看看这张质粒双酶切的电泳图，上方边缘怎么会这么毛糙，本来是要切胶纯化后作插入目的片段的，怕会影响后面的连接，所以没纯化！已经出现两次同样的状况了，之前做的时候都还是很干净的一条带，不知道是怎么回事啊！载体是pGL3-Basic，酶切位点Mlu I和Xho I，酶切2小时后，1%琼脂糖凝胶电泳，80v电压45min。大家快来帮帮我吧 falan87 我最近也在做双