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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验General Protocol to Prepare Neuronal Cultures
until ready to use. 2. When ready to plate, make up 2 mls of enzymatic solution in shipping media without B27 (Hibernate-Ca; 5 mls supplied) containing 4 mgs (2mgs/ml) of papain. Make sure to sterile filter solution with a 0.2 micron filter after adding
RNase-Free DNase 30 Kunitz Units - - - GlutaMAX - 2mM - - Non-Essential Amino Acids - 1× - - HEPES - 10mM - - N2 - 1× - - B27 - 1× - - Heparin - 4μg/ml
,促进解离。 4、向悬浮液中加入 50μl 脱氧核糖核酸酶(2mg / ml),并在 20°C-22°C 下孵育1min。 5、加入 8ml 预冷的 DMEM/F12(含 10%FBS)终止消化。 6、将悬浮液经过 70μm 细胞筛网过滤,收集解离的细胞。 7、将过滤的细胞悬液在 4℃ 条件下 220g 离心 5min。 8、用 1mlDMEM / F12(20°C-22°C)冲洗细胞一次,离心收集细胞沉淀后,加入500μl DMEM / F12(20°C-22°C)重悬细胞,并在细胞计数后,将细胞
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