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文献和实验Clonality - X Chromosome Inactivation Assay
(1:1:1, v:v:v) (Gibco) 3 M Na Acetate, pH 5.2 (Life Technologies) Isopropanol Glycogen, 10 mg/ml (GenHunter) 70% ethanol Buffer 1 (50 mM Tris-HCl, pH 8.0, 10 mM MgCl2, 50 mM NaCl) Hha I restriction enzyme (Life Technologies) REact 2 Buffer
/L Tris-HCl、pH8.0，0.01mol/L EDTA、pH8.0。 配制方法：按上述各物质终浓度，把各自均配制成十倍浓度的溶液，配制溶液Ⅰ时，取三种十倍溶液各1体积于一容器中，定容至10体积即得溶液Ⅰ。 配制体积 500mL 1000mL (1)葡萄糖(M=198.17)： 0.05 mol/L 4.954g 9.909g 10倍： 0.5 mol/L 49.54g 99.09g (2) Tris-HCl(M=121
洗脱液，接着按照3.2b进行）2a.加入2ulRNaseA(0.5mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。DNA采用PCR纯化试剂盒中厂家说明进行纯化。样品冻存于-20°C.样品之所以加入RnaseA是因为高浓度RNA会在使用PCR纯化试剂盒时干扰DNA的纯化。而纯化柱子的饱和度是既定的。2b.加入5ul蛋白酶K(20mg/ml).加热至65°C摇晃4-5小时或者过夜以逆转交联。采用酚/氯仿抽提的DNA使用乙醇沉淀于10ul的糖原(5mg/ml).中。100ul水重悬浮。样品
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