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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验但是不可逆的方式结合。由于表面包被层的多孔性和厚度使单位面积的DNA结合能力比常规化学表面处理玻片要高得多,使得检测更加灵敏。其杂交方式和传统的杂交一样。适用的检测方法包括同位素检测、化学发光法和荧光检测——由于包被的多聚物有效降低对入射光的散射,FAST Slide同样适合用激光共聚焦成像系统进行荧光检测。 TeleChem ArrayIt Super Microarray Substrates(25mm x 76mm)采用高清洁度,超平表面的的玻片并进行化学修饰,各项技术指标居同类产品前列
切片(厚10~30μm)最佳。切片贴在预先清洁,高温处理并涂以粘附剂载玻片上,先在37℃预干燥4h,然后置于37℃烤箱中过夜。经过上述处理的切片如在-20℃可保存2~3周,在-70℃可保存数月之久,有报告可保存数年之久的。但仍以新鲜制片为好。如为石蜡包埋切片,应脱蜡经梯度酒精入水。一般不提倡浸入二甲苯溶液。但在细胞内mRNA含量高时应用二甲苯脱蜡后仍能显示。经水洗后入37℃烤箱4h或过夜,然后进行杂交前处理。 在烘烤及低温保存时,为防尘埃及空气中RNA酶的污染,宜用锡箔
剂。 (二)玻片和组织切片的处理 1.玻片的处理玻片包括盖片和载片应用热肥皂刷洗,自来水清洗干净后,置于清洁液中浸泡24h,清水洗净烘干,95%酒精中浸泡24h后蒸馏水冲洗、烘干,烘箱温度最好在150℃或以上过夜以去除任何RNA酶。盖玻片在有条件时最好用硅化处理,锡箔纸包裹无尘存放(硅化方法见附录)。 由于ISHH的实验周期长,实验程序繁杂,因此,要应用粘附剂预先涂抹在玻片上,干燥后待切片时应用,以保证在整个实验过程中切片不致脱落。常用的粘附剂有铬矾-明胶液,其优点是价廉易得
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