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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验以蛋白分子为靶目标的噬菌体肽库模拟抗原的筛选 (1)将单克隆抗体 用包被液CBS稀释,加入酶标板,一般抗体包被浓度为10ug/孔,包被体积为100ul/孔,稍加晃动使孔表面变湿,置于4℃下包被过夜(或37℃慢摇孵育2h)。第二天倾去板中包被液,每孔加入200ul/孔洗板液(PBST05),静置5rain,甩去洗板液,于无菌干净的滤纸上拍打,以尽量除去剩余的液体,重复洗5次,以下的洗板操作都与此相同。加入封阻液(PBSTOS-1%BSA)200ul,于37℃
镊 9. 离心管(15ml、50ml)、10cm塑料培养皿、300ml有盖的三角烧瓶(2个,处理胶原酶及蛋白酶用)、高压灭菌的带尼龙网(孔径150μm)的烧杯 10. 厚胶原胶的制备:以8:1:1(体积比)的比例配制鼠尾胶原、F12与NaHCO 3 /NaOH的混合液作为包被液。包被液的组分包括鼠尾胶原液、10×浓度的F12、0.26mol/L NaHCO 3 和0.125 mol/L NaOH混合液。分别除菌。将包被液和培养板在4℃下预冷。然后,按150
)来阻止细胞的分化。为细胞提供包被有0.1%明胶的平板作为粘附细胞的基质。建议每2-3天从达到80%-90%融合的平板按1:8的比率传代细胞一次,细胞传代以后,在将细胞接种在0.1%明胶包被的培养皿之前,通过预先将细胞接种在没有经过包被的组织培养板2个小时,使分化细胞粘附,从而将分化和未分化细胞分开。将细胞全程置于37℃,5%CO2,100%湿度条件下培养。如果在Feed细胞,那么就需要采用MMC进行处理,抑制Feed细胞增殖,但仍然能保持其分泌LIF因子的活*。下文中暂不提及Feed细胞。Feed
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