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文献和实验C24 H40 O5 3α， 7α， 12α三羟基 -5 β胆烷酸，是广泛分布于以人为首的脊椎动物中的最主要的胆汁酸。在胆汁中，以与甘氨酸或牛磺酸结合成甘胆酸（ glycocholic acid）或牛磺胆酸的形态存在。
加热灭活酶。通过凝胶提取试剂盒纯化消化的pET-32α（+）载体骨架和从pMD18-T载体切下的基因片段。用T4 DNA连接酶在23℃下用pET-32α（+）载体骨架连接基因片段1小时，载体末端和插入末端的比例为1：3（fmol）。将10μl连接反应与100μl感受态大肠杆菌 BL21（DE3）在冰上混合10分钟，并将混合物在42℃下孵育90秒。加入800μlLB并在37°C下孵育40分钟。涂在含有100μg/ ml氨苄青霉素的LB平板上。在37°C孵育过夜。通过菌落PCR筛选插入物的存在或制备
and the loading of crRNA ontoCas9 (Fig. 2a ) [ 16 – 18 ]. Our previous work demonstrated that by harnessing the well-understood CRISPR-Cas9 system from Streptococcus pyogenes SF370, we could develop a system that is sufficient for carrying out site-specifi c DNA
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