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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验免疫亲和层析是以 Fab 片段为基础的无痕亲和细胞分选技术(traceless affinity cell selection, Fab-TACS)。Fab-TACS 运用免疫亲和层析的原理,使用细胞表面抗原分子 CD marker 中的 Fab 片段来进行捕捉及释放目的细胞。以抗体的 Fab 片段取代一般具有高亲和力的完整抗体,实现试剂与细胞的可逆结合,直接从全血或其他血液样本中分选目的细胞。 Fab-TACS 柱子填充了包被有 Strep-Tactin® 多聚体的细胞级琼脂糖基质,偶联
(hematopoietic stem cells) 和CD279 (PD-1)。 · 将孵育好的样品加入到 1 ml 的 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析柱上(柱子最大结合能力:1 x 108个细胞)。 · 当样品完全进入柱子后,加入 10 ml Buffer洗脱两次,就可以得到未结合的细胞了。后续使用流式细胞术检测富集的 NK 细胞。 (此处用到的试剂见文末) 结果与讨论 通过使用阴选将非目的细胞去除后,获得了高纯度的目的细胞群。实验用到了 Strep-Tactin®TACS 琼脂糖层析
后可imidazole 洗脱目标蛋白质。(Pharmacia 操作手册, Affinity Chromatography)。仪器设备:亲和层析管柱 (Bio-Rad 731-1550 Poly-Prep column, 0.8×4 cm)部分收集器 (另需准备干净试管约25 支)药品试剂:金属螯合亲和层析胶体 (Ni-NTA agarose, QIAGEN 30210) 1 mL◆ 在交联琼脂糖凝胶上接有nitrilotriacetic acid (NTA) 官能基,可以螯合镍离子;使用前先以镍离子饱和
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