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优化你的类器官培养水凝胶选择

/iPS细胞的长期培养提供了所需的优化ECM包被，并支持在多种无血清/无饲养层人ES/iPS扩增培养基（例如，mTeSR®、PluriSTEM™）中培养人ES/iPS细胞。以下是使用干细胞合格的ECM凝胶基质包被6孔板的一般指南。 所有操作程序均应在生物安全柜中的无菌条件下进行。 1.使用前一天，在2-8 °C冰箱中解冻ECM凝胶基质（CC131）。解冻后，将ECM凝胶始终置于冰上，并使用预先冷却的培养基和移液器，以避免产品凝胶化。 2.用冷的DMEM/F12（D6421）培养基稀释ECM凝胶

人 iPS 细胞体外分化为气道上皮肺类器官用于呼吸系统疾病研究应用以及iPSC操作指南

Min Lu , Kevin Su , Nick Asbrock , Vi Chu 肺类器官是常用的三维(3D)细胞培养模型，用于研究人类肺部发育和呼吸道疾病，包括病毒感染(SARS-CoV、H1N1、MERS)、囊性纤维化、哮喘/COPD、空气污染暴露和吸烟的影响。与传统的永生化肺细胞系和原代细胞不同，肺类器官包含各种分化的细胞类型，具有复杂的组织结构，更接近于体内组织和功能。 此外，肺类器官可以从少量患者组织或多能干细胞中提取，以创建有助于个性化生物医学研究的活体生物库。 3dGRO™

细胞培养的操作步骤

)，在冻存前1d换液。 （2）按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×107／ml左右密度，离心，去上清。 （3）加入配制好的冻存液（培养液6.8ml，小牛血清2ml，DMSO 1ml，5.6%NaHCO3 0.1ml），按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜(DMSO) 或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 （4）分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 （5）旋好冻存管并仔细