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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验或超声清洗(HiPrep 与 Precision Columns 3.2/300 柱型不能拆卸换膜);必要时移除层析柱顶端 2~3 mm 凝胶,调节 Adaptor 消除顶端死体积。部分预装柱,也可以将填料倒出,去除板结或碎填料后,重新装填。测定柱效或重复之前做过的样品。后续注意样品前处理(如核酸的去除、样品缓冲液条件)以及层析柱的日常维护。 图 1:凝胶过滤分离原理 绝招二:凝胶过滤层析的三大应用种类 根据应用目的的不同
信号减弱。 检测膜蛋白一般不建议使用甲醇或丙酮固定,有机溶剂能够破坏膜结构。 4. 透化方法不当 检查靶标蛋白表达位置,胞内蛋白需要透化处理。 膜蛋白需要考虑所检测靶表位位于膜内还是膜外,膜外则不需要透化。 5. 二抗选择不当 二抗选择建议如下: 6. 信号放大不够 如果检测靶点是低丰度蛋白.信号弱可能是由于信号放大不足导致的,可以使用Invitrogen SuperBoost 酪胺信号放大技术,进一步增强信号,实现低丰度,难以检测蛋白的检测
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色
双苯咪唑类的Hochest-33342和33258及 JC-1染色 双苯咪唑类的Hochest-33342和33258 该染料可渗透细胞 膜进入细胞内,与DNA结合,使之染色。凋亡细胞对该染料的摄取增高,染色后呈强蓝色荧光。其实验方法如下。 (1)细胞培养及凋亡的诱导:将细胞接种在10cm的培养皿中(106 细胞),在适当的时机诱导细胞凋亡。 (2)收集细胞:悬浮生长的细胞
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