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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验提供miRNA定量检测启动装,一个试剂盒里面包含逆转录、内参引、阳性对照、real-time PCR扩增所有的组分,您很快就可以学会定量分析microRNA的表达量了。 实验进行到这里,只是在进行miRNA量变的研究,更进一步可以升华到某些特定miRNA功能的探索,采用类似RNAi沉默技术,miRNA同样可以被沉默或者高表达,QIAGEN提供miRNA Inhibitors和miRNA Synthesis 产品来分别完成,详细的实验方案请见下回分解。 microRNA 研究实验导航—功能分析 找到差异
加入荧光试剂,利用荧光信号实时检测PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR能够专一、灵敏、快速、高重复性地精确定量起始模板浓度。但是就成熟的microRNA而言,由于其是由21-25个核苷酸组成的小RNA,长度太短,并不能通过传统的实时定量PCR进行检测,但是通过特殊设计的茎环结构的反转录引物,配合实时定量PCR引物及探针可以精确检测微量样品中microRNA表达水平,也可以用终点PCR法定性检测。 图二 miRNA 实时荧光定量
mirror122 大家好,我从中山大学发表的论文中看到,他们没有提取RNA,而是直接用特异的引物对其中的microRNA进行反转录,然后再做定量PCR,不知道大家有人用过这种方法吗?可行吗? haidaweishengwu 我也在座microRNA的提取,有机会交流一下 mirror122 好呀,不知道你是怎么提取RNA的? huahuaxxh66 现在检测
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