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文献和实验, Cas9 mediates cleavage of target DNA upstream of PAM to create a DSB within the protospacer. ( b ) Design of chimeric sgRNA for genome cleavage. The SpCas9 nuclease ( yellow ) binds to genomic DNAdirected by the sgRNA consisting of a 20-nt guide
基因编辑技术是一种通过使用靶序列特异性工程核酸酶来操纵真核基因组的新兴治疗手段，包括模型细胞系的开发、疾病机理的发现、疾病靶标的确定、转基因动植物的开发和转录调节。 由于基因编辑技术在促进基因组中序列的正确校正方面所具有的特殊优势，基于基因编辑的疗法正被积极地开发为治疗多种疾病的下一代治疗方法。到目前为止基因编辑系统历经 3 代，包括锌指核酸酶（ZFN）、转录激活因子样效应子核酸酶（TALEN）和 CRISPR/Cas9。 1. 锌指核酸酶（zinc-finger nuclease，ZFN
to synthesize and probably more nuclease resistant. We used to select siRNA sequences with TT in the overhang.The targeted region is selected from a given cDNA sequence beginning 50 to 100 nt downstream of the start codon. Initially, 5' or 3' UTRs and regions
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