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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验新鲜的组织块 0.5 - 1 g 左右,若为临床样本则按实际大小收集,装入样本冻存管中,若体积较大,需用手术刀或手术剪分割后保存; 2) -80℃ 冰箱中保存; 3) 填写样本登记单,记录样本名称、类型、编号、取样日期、样本处理过程等情况。 7、脑脊液 1) 收集脑脊液 10 mL,样本一经分离,请务必立即置于冰上或 4℃ 短暂保存(不得超过 4 h),避免受到血液污染; 2) 300 g,4°C,离心 10 min,去除细胞等杂质; 3) 3000 g,4°C,离心 15 min,去除细胞
膜蛋白在生物体的许多生命活动中起着非常重要的作用,如细胞的增殖和分化、能量转换、信号转导及物质运输等。据估计大约有 60% 的药物作用靶点是膜蛋白。 大多数膜蛋白的含量较低, 另外用于溶解细胞膜上 GPCR 的高浓度洗涤剂进一步限制了下游的纯化方法。传统的色谱方法,如离子交换或疏水色谱,对于从稀释的含清洁剂的溶液中纯化大量蛋白质是无效的。膜蛋白的纯化仍是目前很多科研工作者遇到的难题之一。 今天,我们就跟大家分享一篇膜蛋白纯化实例。 人大麻素受体 CB2 是一种完整的膜 G 蛋白
蛋白样品制备中,在细胞破碎之后,既可以利用特定蛋白质的特性来分离某一类蛋白质,比如亲和纯化,比如前面介绍的磷酸化蛋白富集,或者膜蛋白富集;另外一个考虑方向是去除杂质----去掉样品中某些非目标高丰度蛋白或者杂质的干扰,同样可以达到简化样本的目的。当然要小心「倒洗脚水的时候别把婴儿也倒掉了」,一定要选择可靠的产品。 比如,潜在疾病标志物的最好样本来源就是血清或其他体液,此类样本可以提供人蛋白质组中绝大部分组份。然而用蛋白质组分析方法鉴定疾病标志物最大的挑战来自于血清中大量的高丰度
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