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细胞冻存的程序降温盒的使用注意事项

，这样才能实现程序降温呢? 时间使用长了，感觉里面的液体是不是异丙醇啊，使用时间长了会不会挥发或变质什么的，要不要添加或维护一下呢，还有有一只降温盒因不小心给倾斜让液体流出了部分，要补充吗? 经验1：冻存盒外表面有刻度的吧，异丙醇液面要高于最底线。4 a. C* D8 Y& P9 A, y 冻存盒肯定是先放在室温，然后放进去细胞，置于-80，利用异丙醇实现梯度降温啊。) ~0 O( O# Q* }: w# D" R' _ 根据论坛里的讨论，异丙醇使用过一段

细胞的冻存与复苏

降低存活率； 4、 注意程序降温盒内异丙醇的量必须高于最低刻度线；冻存5次后异丙醇需要更换一次，以免影响冻存效果；程序降温盒需恢复到室温以后才能继续使用，不能从冰箱拿出来直接使用； 5、 细胞悬液加入冻存液以后尽量短时间的在常温放置，DMSO常温下对细胞损伤大，分装完成后立即转入程序降温盒放到-80度冰箱，不需要放4度； 6、 -80度冻存过夜后可以转入液氮长期保存，转入液氮的过程需要对冻存盒进行保冷，不要长时间在常温暴露，避免冻存管融化； 7、 若没有液氮罐，存放在-80度的时候一定要放靠里面

Nat Commun：结直肠癌致癌突变 RNF43_pG659fs 对 PI3K/mTOR 抑制剂敏感

显示 RNF43_p.G659fs 突变在结直肠癌中对 PORCNi 不敏感，目前没有针对该突变的治疗策略 5。 为探究 RNF43 在结直肠癌中的功能和作用，作者通过临床前模型（CRISPR 编辑的细胞系、患者衍生的类器官和异种移植小鼠模型），发现 RNF43_p.G659fs 不同于 p.R117fs，能够以不依赖 Wnt 配体信号的方式促进肿瘤细胞增殖，并且不引起 Wnt 信号通路激活，提示了 RNF43_p.G659fs 不是 passanger mutation，在结直肠癌中具有不依赖 Wnt