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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验。 4、低温原则 所取样本离体后,应尽快置于干冰或 -80℃ 冰箱中,并保证在实验前始终处于 -70℃ 以下, 以避免外泌体降解。 二、样本制备指南 1、细胞上清 1) 细胞在正常含有血清的培养基中培养一定时间,贴壁细胞密度在 70%-80%,悬浮细胞密度在 60%-70%; 2) 对于贴壁细胞,去除原有培养基,加入适量的 PBS 缓冲液冲洗一次,彻底去除血清;对于悬浮细胞,300 g ,4℃,10 min 收集细胞,然后换为新的不含外泌体的培养基或者无血清替代培养基继续培养 24-48 h, 根据细胞
Purification Kit 纯化 PCR 产物对比,其中 b 为纯化前 PCR 产物,a 为纯化后产物,M 为 marker。 8. 感受态细胞效率不高?如何制备/选择/保存 制备: 感受态细胞的制备核心步骤包括菌体培养、低温处理、钙离子/电击诱导和分装冻存。实验过程中需注意无菌及低温操作,且需要在大肠杆菌中加入冷冻保护剂(如 10%-15% 甘油或 DMSO),其作用是降低冰点、减少冰晶形成,从而保护感受态细胞的转化效率; 选择: 常见的大肠杆菌感受态细胞有多种,它们具有不同的基因型,通过基因
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