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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有G418的选择性培养基中生长。G418的这一选择特性 ,已在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用。 G418使用方法 室温下运输, 干粉在室温下储存,溶于水、甲醇,溶液于-20℃储存 由于各真核细胞系对G418敏感度不同,各新细胞系或株稳定转染时杀死非稳定转染细胞所需用量需要通过实验优化。最适用量通过建立细胞死亡曲线获得。将细胞稀释至1000cell/ml,每孔100ul加入有培养基的24孔板,将每孔中的G418浓度
Purification of Plasmid from 50 ml-culture
2. Spin the bacterial culture at 6,000 rpm for 10 min at 4 C. Discard the supernatant. 3. (0ptional) Suspend the cell in about 20 ml of deionized water. Spin again. Discard the supernatant. Remove all of the supernatant fluid using pipetman.
相关专题 1.G418的配制 : 方案一: 300mgG418加入3ml PBS 溶液,浓度为100mg/ml,完全溶解后,0.22um 过滤,-20℃保存。 方案二:(1)配制1M HEPES:23.8g HEPES(缓冲能力更强)粉末溶于100ml ddH2O,10N NaOH(加量较多)调节pH至7.3,过滤除菌 (较难过滤),4℃保存,终浓度为1mol/L。 (2)5g
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