Amersham特约代理商|RPN303B HyBond N

初学者的Southern杂交与化学发光检测

链。 4. 将胶浸入中和液(0.25 mol/L NaOH、1.5 mol/L NaCl)中平衡20 min。 5. 准备一个供DNA从胶上向尼龙膜转移的玻璃平台。将一张0.2um的Hybond-N+尼龙膜(英国Amersham公司生产)和一张滤纸切成与待转移胶相同大小，另将一张滤纸切成与胶相同宽度，长度较长足以达到盛转移液盒子的底部。 6. 将较长的滤纸在转移液(0.25 mol/L NaOH、1.5 mol/L NaCl)中浸湿后置于平台上，两端浸入转移液中(使溶液不断

小RNA的Northern BLOT

ml DEPC H2O~1.8% dye. Mix 95 uL Formamide with 5 uL 1.8% Bromophenolblue/Xylene cyanolFF Note: can use less dye. Hybond N+: Amersham RPN303B ULTRAhyb-Oligo Hybridization Buffer: Ambion cat # 8663, keep in refrigerator T

小麦Southern杂交分析方法

；2、在1%的琼脂糖凝胶上电泳10~12 h，电压为3 V/cm；3、电泳完毕后，将胶转入EB染色液中，染色10 min，紫外灯下检测酶切结果；4、将胶转入500 ml 0.25N的HCl中，脱嘌呤15~30 min，直至溴酚蓝变黄，用水洗一下；5、0.4 N的NaOH处理20 min。与此同时，尼龙膜在超纯水中润湿后，在0.4 N的NaOH中泡5 min以上；6、将凝胶翻转后放在滤纸桥上，放上一张与凝胶大小相当的尼龙膜（Hybond-N+，Amarsharm），赶除气泡，在膜上放3层滤纸，与尼龙膜大小相同