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上海玉博生物科技有限公司
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文献和实验背景并为仪器所识别时的循环数),较高的荧光信号强度以及良好的曲线峰值。所以对其的浓度选择应慎重。一般来说,对以DNA或cDNA为模板的PCR 反应,应选择2-5mM浓度的MgCl2 ,对以mRNA 为模板的RT-PCR 而言,则应选择的浓度为4-8mM。 2)模板的浓度:如果研究者是进行首次实验,那么应选择一系列稀释浓度的模板来进行实验,以选择出最为合适的模板浓度,如果条件困难,也至少要选择两个稀释度(高和中、低浓度)来进行实验。一般而言,使Cp位于15-30个循环比较合适,若大于30则应使用
以500 rpm的速度旋转,能保证样品间具有极高的温度均一性(±0.01ºC),从而大大提高了反应的稳定性。 可同时检测FAM、JOE、ROX和Cy5等4种荧光信号,适应于多个目标基因的复合检测。 Rotor Gene 3000型荧光定量 PCR仪 的主要参数: Excitation Source: 470
1-ETO[t(8;21), 见于M2b], BCR-ABL[t(9;22), 见于CML和ALL], TEL- AML1[t(12;21), 见于儿童前B-ALL]等等, 为方便起见, 商品化的探针多为标记的, 即两个基因分别用两种颜色标记, 同时在一张玻片标本上杂交. 用FISH进行融合基因检测比常规的染色体核型分析要准确, 其敏感性虽略低于RT- PCR方法, 但其假阳性和假阴性率却大大低于PCR法. 若核型分析, RT-PCR, FISH三者结合则可大大提高白血病诊 断的准确
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