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外泌体载药研发新突破：小 RNA 的新武器

miR-21-5p 的水平，数据显示，电转后外泌体中 miR-21-5p 的水平显著高于共孵育后 miR-21-5p 的水平。 图三 qPCR检测外泌体中 miR-21-5p 含量 3)从转染的荧光结果来看，相比空细胞组，外泌体电转 mimic NC 后转染入目的细胞中的荧光强度要明显高于外泌体与 mimic NC 共孵育后在目的细胞中的荧光强度，故 mimics 通过电转进入外泌体的效率要远高于通过共孵育进入外泌体的效率。 图四 外泌体电转和共孵育转染荧光对比 4)从检测目的细胞中 miR

DNA甲基化研究方法的回顾与评价（下）

]。 MSO要求预先设计一对含有2个不相邻的GC（或AC）的探针，用于识别甲基化和非甲基化的序列，其中含GC的探针（5[42]'---GC---GC---3'）识别甲基化序列，含AC的探针（5'---AC---AC---3'）识别非甲基化序列，探针的5'端通过Linker固定于玻璃板上。首先对待研究片段用重亚硫酸盐处理，将非甲基化的胞嘧啶变为尿嘧啶，甲基化的不变，再行PCR扩增，产物的3'端用荧光素标记，移至连有探针的玻璃板上进行杂交，通过检测杂交后产生的荧光强度判断待测序列中甲基化的水平。此方法一定

如何做好 Southern 杂交？

加入：Labeling 5× buffer 10 μl（含有随机引物）dNTPmix 2 μl(含 dCTP、dGTP、dTTP 各 0.5 mM)BSA（小牛血清白蛋白）2 μl[ a -32 P]dATP 3μlKlenow 酶 5 U3. 将变性模板 DNA 加入到上管中，加 ddH2O 至 50 μl，混匀。室温或 37 ℃ 1 hr。4. 加 50 μl 终止缓冲液终止反应。标记后的探针可以直接使用或过柱纯化后使用。由于 a -32 P 的半衰期只有 14 天，所以标记好的探针应尽快使用。探针的比活性最好