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- FT-LY0656
- 2025年07月16日
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- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名：
详见说明书
- 库存：
55
- 细胞类型：
详见说明书
- 品系：
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- 组织来源：
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- 相关疾病：
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- 物种来源：
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- 免疫类型：
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- 细胞形态：
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- 器官来源：
详见说明书
- 运输方式：
常温/干冰运输
- 年限：
详见说明书
- 生长状态：
贴壁&悬浮
- 规格：
5×10^5
产品规格：5×10^5Cells/T25培养瓶
用途：用于科研实验。
产品资料：（点击获取）
公司经营的ELISA检测试剂盒种类齐全，可以检测：人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
均为现货，支持快递包邮，试剂盒提供免费代测服务
兔关节软骨细胞
注意事项：
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 产品仅供科研先不开瓶盖，瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时（4h左右），稳定细胞状态，切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检，拍照，记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞：若细胞密度超过80%，可正常传代；若未超过80%，收集细胞瓶内的培养基，留8ml继续培养至80%左右再传代，瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗，可收集后4℃保存备用，可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基，一半用客户自备的培养基，使细胞逐渐适应培养条件，以免因不适应而造成生长状态不佳。
兔关节软骨细胞
细胞的冻存方法：
1．细胞：选对数生长期细胞，收集细胞24小时前换液一次。
2．计数：按常规方法把细胞制成细胞悬液，计数，令细胞密度达5×106/ml，离心去上清，吸入离心管中。
3．冻存液：先用培养液9分＋DMSO 1分（或甘油）配成10％的DMSO冻存液，按上法一滴滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4．分装：分装入无菌安剖中，每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5．封口：用塑料安剖时拧紧瓶口即可；如用火焰封闭安剖口后，仔细检查，定要封严，必要时可浸入蓝色液中观察，为安全起见，把安剖缝入纱布小袋中，以防液氮浸入后，融解时因受热发生爆炸伤人；纱袋一端系以线绳，末端扎有小牌，注明：细胞名称，冻存日期，以便日后查找。
一、细胞复苏的方法：
1．从液氮罐中取出安剖；有时因安剖未封严，浸入了液氮，取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸，因此应带有防护眼睛和手套。
2．迅速放入盛有36℃～37℃水的搪瓷罐中，扣上盖并不时摇动，尽快解冻。
3．剪开纱布口袋，取出安剖，用70％酒精擦拭消毒后，净化台上打开盖，用吸管吸出细胞悬液，装入离心管中，再补加10ml培养液，吹打使细胞悬浮。
4．低速离心（500～1000转/分）5分钟，取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5．加入培养液适当稀释后，再移装入培养瓶中，置温箱培养，次日更换一次培养液后再继续培养。
二、细胞处理：
1、复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
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文献和实验试剂和材料： 1. 分化培养基：DMEM/F12（1：1）、1%ITS（胰岛素、转铁蛋白、硒；V/V）、TGF-β1 1ng/ml、HEPES 10mmol/L； 2. 胰蛋白酶/EDTA：胰蛋白酶（0.05%）和EDTA（0.53mmol/L）PBSA配制； 3. PBSA：无Ca2+,Mg2+的Dulbecco′s磷酸盐缓冲液； 4. 离心管，15ml； 5. 普通器皿，30ml，或圆锥底的离心管（50ml）； 实验方法： 1. 从培养瓶中吸出生长培养基弃之； 2.
软骨细胞的原代培养龄新西兰乳兔(雌雄不限，共18只，分6次处理),溺死，置于75％酒精溶液中10分钟，拿入超净工作台，自眼外眦至耳屏前剪开皮肤暴露皮下组织，再次严格消毒，自外眦外将颧弓由根部剪断，暴露髁状突，去净髁状突表面软组织及软骨膜，以眼科剪剪取髁状突表面的透明软骨，以磷酸缓冲液（PBS含青霉素、链霉素各100U/L）冲洗2遍，将软骨剪切成1－3mm3 左右碎块，0.25%胰蛋白酶先消化30-35分钟，PBS浸洗2遍；后置于50ml玻璃培养瓶，加0.1％Ⅱ型胶原酶(DMEM配制)，37消化
以兔软骨细胞为例： ①一般根据实验要求，选取不同年龄组的兔子，实际上兔子的年龄越小越好，毕竟幼体组织的活力要高于成体组织的活力，耳静脉空气注射法处死后,无菌条件下分离后肢关节软骨和肋软骨，剥离包裹软骨组织的筋膜和软骨膜，放入盛有PBS液的培养皿中。 ②将分离得到的软骨组织剁碎成0.3-0.5mm的组织块，移入25cm2培养瓶，用含双抗的PBS液冲洗软骨3次。 ③加入软骨体积10-15倍的0.25%胰蛋白酶，37℃消化１－２小时后终止消化。 ④加入0.02%II型胶原
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