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详见说明书
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55
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- 运输方式:
常温/干冰运输
- 年限:
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- 生长状态:
贴壁&悬浮
- 规格:
5×10^5
产品规格:5×10^5Cells/T25培养瓶
用途:用于科研实验。
产品资料:(点击获取)
公司经营的ELISA检测试剂盒种类齐全,可以检测:人、大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、裸鼠、马铃薯、鹿、羊、鸡、鸭、鱼、兔子、猪、犬、猴、马、牛等动植物。
均为现货,支持快递包邮,试剂盒提供免费代测服务
小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 产品仅供科研先不开瓶盖,瓶身擦拭酒精后放在培养箱静置数小时(4h左右),稳定细胞状态,切忌在温箱内静置过夜。
3. 静置后镜检,拍照,记录细胞状态。建议传代后也拍照记录细胞生长情况。
4. 贴壁细胞:若细胞密度超过80%,可正常传代;若未超过80%,收集细胞瓶内的培养基,留8ml继续培养至80%左右再传代,瓶盖可稍微拧松。
5. 细胞瓶内的培养基含血清和双抗,可收集后4℃保存备用,可补加2%血清。刚开始传代时建议一半用细胞瓶内的培养基,一半用客户自备的培养基,使细胞逐渐适应培养条件,以免因不适应而造成生长状态不佳。
小鼠骨髓树突状细胞(DC细胞)
细胞的冻存方法:
1.细胞:选对数生长期细胞,收集细胞24小时前换液一次。
2.计数:按常规方法把细胞制成细胞悬液,计数,令细胞密度达5×106/ml,离心去上清,吸入离心管中。
3.冻存液:先用培养液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO冻存液,按上法一滴滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。
4.分装:分装入无菌安剖中,每安剖加1.5毫升细胞悬液。
5.封口:用塑料安剖时拧紧瓶口即可;如用火焰封闭安剖口后,仔细检查,定要封严,必要时可浸入蓝色液中观察,为安全起见,把安剖缝入纱布小袋中,以防液氮浸入后,融解时因受热发生爆炸伤人;纱袋一端系以线绳,末端扎有小牌,注明:细胞名称,冻存日期,以便日后查找。

一、细胞复苏的方法:
1.从液氮罐中取出安剖;有时因安剖未封严,浸入了液氮,取出后因安剖内液氮迅速气化而发生爆炸,因此应带有防护眼睛和手套。
2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上盖并不时摇动,尽快解冻。
3.剪开纱布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,净化台上打开盖,用吸管吸出细胞悬液,装入离心管中,再补加10ml培养液,吹打使细胞悬浮。
4.低速离心(500~1000转/分)5分钟,取上清后再重复用培养液漂洗、离心。
5.加入培养液适当稀释后,再移装入培养瓶中,置温箱培养,次日更换一次培养液后再继续培养。
二、细胞处理:
1、复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2、细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
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文献和实验出奇特的形态。 7、进行您的工作 重悬并计算细胞,您现在可以用单核DC细胞进行下一步的工作。另外,可以用流式细胞仪检测 CD14,CD45 和 CD83 来验证树突状细胞的免疫表现型。 注意:使用混合有细胞因子包的 PromoCell 的 DC 生成培养 基DXF传代得到的成熟单核 DC 细胞的表面抗原形态为 CD14-/CD45+/CD83+。 相对应细胞形态一览表 DC的主要特点: • 不需要磁珠等复杂方式
tigerbin 请教各位大侠: 有没有研究microRNA与树突状细胞免疫功能方面的?现在microRNA的研究已经遍及肿瘤,免疫,心血管疾病,病毒等,如miR-155,有关它与免疫的研究,本人看的几篇文献主要是利用转基因技术敲除小鼠体内Bic基因(miR-155系BIC基因的表达产物,产生于活化的B细胞、T细胞、巨噬细胞、树突状细胞等),检测bic/miR-155-/-小鼠B,T,DC细胞分化,成熟,活化情况,及功能改变等。 miR-155
养BMDC有好几个月了,看了2、3篇文献就开搞,发现论坛里还是有一些战友养这个。就想开个专题讨论贴,请新手老手都上来谈谈经验或者问些问题。集思广益,大家相互促进下。 我在论坛里看到因为有战友养DC看百把篇文献的,感到佩服又奇怪,就BMDC的培养我目前只知道有个经典版本和改良版本。 我用的是改良版本,参考文献改天附上(可能养这个的战友大多看过了)。 1. 取小鼠股骨胫骨,小鼠要年轻!(6W-8W,以前用只一年左右的养出来外形也张牙舞爪,但流式检测没有CD11c表达,很奇怪
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