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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
贴壁生长
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
5*10^5
用途:可用于科研实验培养某一类型细胞没有固定的培养条件。
疫吸附试验法) ELISA Kit for Homing Associated Cell Adhesion Molecule (HCAM) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
钙网蛋白(CRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calreticulin (CRT) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
钙腔蛋白(CALU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Calumenin (CALU) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
成纤维细胞生长因子19(FGF19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Fibroblast Growth Factor 19 (FGF19) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
S100钙结合蛋白A8(S100A8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for S100 Calcium Binding Protein A8 (S100A8) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
白介素17F(IL17F)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Interleukin 17F (IL17F) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
ⅩⅢ型胶原(COL13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type XIII (COL13) 48T/96T Homo sapiens (Human)
Ⅶ型胶原(COL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Collagen Type VII (COL7) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for D-Dopachrome Tautomerase (DDT) 48T/96T Mus musculus (Mouse)
弹性蛋白酶3B(ELA3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 3B (ELA3B) 48T/96T Rattus norvegicus (Rat)
泛素关联蛋白2(UBAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Ubiquitin Associated Protein 2 (UBAP2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
尿溶蛋白3A(UPK3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Uroplakin 3A (UPK3A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
序列相似家族20成员A(FAM20A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Family With Sequence Similarity 20, Member A (FAM20A) 48T/96T Homo sapiens (Human)
半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cysteinyl Leukotriene Receptor 1 (CYSLTR1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
弹性蛋白酶(ELA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Elastase 2A (ELA2A) 附试验法) ELISA Kit for Kindlin 2 (KIND2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
磷酸神经膜蛋白(PLM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Phospholemman (PLM) 48T/96T Homo sapiens (Human)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶1(GALNT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 1 (GALNT1) 48T/96T Homo sapiens (Human)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(GALNT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 2 (GALNT2) 48T/96T Homo sapiens (Human)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶3(GALNT3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 3 (GALNT3) 48T/96T Homo sapiens (Human)
胰腺星状细胞多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 4 (GALNT4) 48T/96T Homo sapiens (Human)
多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶6(GALNT6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Polypeptide-N-Acetylgalactosaminyltransferase 6 (GALNT6) 48T/96T Homo sapiens (Human)
肾胱素7(NPHP7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Nephrocystin 7 (NPHP7) 48T/96T Homo sapiens (Human)
颗粒酶H(GZMH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Granzyme H (GZMH) 48T/96T Homo sapiens (Human)
Cupidin蛋白(CPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法) ELISA Kit for Cupidin (CPD) 培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项:
1. 收到细胞后先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
实验步骤:
1. 将解剖用的剪刀、镊子和刀片进行无菌消毒。
2. 将怀孕小鼠用颈椎脱位法处死,将其固定在解剖板上。
3. 用70%乙醇喷洒在小鼠的腹部进行消毒,用一把剪刀和一把镊子把孕鼠外皮剪开,用另外一把剪刀和一把镊子把内皮剪开,露出子宫,最后用第三把剪刀和镊子将子宫小心取出放在盛有PBS的玻璃平皿中,冲洗去血。
4. 用两把弯镊子将胚胎外的胞膜小心去除,然后夹掉头和内脏,将其余胚胎转移到一个装有30 mLPBS的50 mL离心管中,轻轻颠倒两次,倒掉PBS,再重复此步骤一次,留少许PBS,将胚胎转移到另一装有PBS的平皿中,用手术刀片将其切碎至可用微量移液器吸取。
5. 用200μL的微量移液器反复快速吹打平皿中的液体,放在15 mL离心管中,
4℃ 1500 r/min离心5 min,倒掉上清液,加10 mL胰蛋白酶,重悬沉淀,37℃水浴中消化30 min,且每隔5 min轻轻晃动,使之充分消化。
6. 将上层细胞悬液倒入一装有10 mL DMEM培养基的50 mL离心管中,用200目尼龙滤网过滤后,1 500 r/min离心5 min,弃去上清液。
7. 用移液管吸取30 mL DMEM培养基,让培养液沿离心管壁缓缓流入管底,1 500 r/min离心5 min,弃掉上清液。重复一次此步骤。 8. 将细胞沉淀用15 mL培养基悬起。细胞计数(8只14天胎鼠可获得(2~3)×107个细胞)。
9. 将3×106个细胞悬浮于15 mL含10%小牛血清的DMEM培养基中,接种到200 mL的培养瓶中。
10. 24 h后更换新鲜的含10%小牛血清的DMEM培养基。
11. 细胞长满后,弃掉培养基,用PBS小心冲洗,倒掉,加胰蛋白酶消化。
12. 轻轻晃动细胞培养瓶,见有细胞浮起,立即加入2 mL血清终止消化,用移液管把细胞轻轻悬起,混匀,使细胞成为单细胞悬液。
13. 1500 r/min离心5 min。弃掉上清液。加入10 mL含小牛血清的DMEM培养基,悬起细胞,按1:5传代。
14. 细胞再次长到覆盖率80%~90%,将其消化后,常规冻存(冻存液要现配)。
15. 实验结果:可拍照存留。
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文献和实验网络 二、胰腺 胰腺表面覆以薄层结缔组织被膜,结缔组织伸入腺内将实质分隔为许多小叶,但人胰腺小叶分界不明显。腺实质由外分泌部和内分泌部两部分组成。外分泌部分泌胰液,含有多种消化酶,经导管排入十二指肠,在食物消化中起重要作用。内分泌部是散在于外分泌部之间的细胞团,称胰岛,它分泌的激素进入血液或淋巴,主要参与调节碳水化合物的代谢(图13-
为人体中很重要腺体。由外分泌和内分泌两部分(外分泌部分占 84%,内分泌部分占 2%)组成。位于胃后方,相当第一、二腰椎高度,横位于腹后壁,重约 65~ 75克,分头、体、尾三部。胰头膨大,被十二指肠所包绕,胰体占胰的大部分,胰尾末端朝向左上方,与脾相触。胰腺的外分泌部为复管泡状腺。小叶内有大量浆液性腺泡和部分导管,小叶间结缔组织内有导管、血管、淋巴管和神经通过。腺泡中的腺细胞呈锥体形。细胞核圆形,位于细胞基底部,核靠基膜,无肌上皮细胞。腺泡特点是腔内有一些着色较淡的扁平
胰腺脓肿是一种继发性的化脓性感染。临床主要表现有上腹痛,寒战,高热,上腹部肌紧张,压痛,触及边界不清的压痛性肿块。发病前有急性胰腺炎或胰腺损伤。 本病有发病急,全身中毒症状重。对本病目前有特效药和方法治疗,治愈率高。疗效欠佳或病死者多数未经正规和及时的治疗,因此早诊断,早治疗是关键。 临床表现 1.急性胰腺炎好转后再出现上腹痛,寒战,高热,半数患者出现黄疸。 2.上腹部压痛,肌紧张,并可触及边界不清的压痛性肿块。 诊断依据
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