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- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
贴壁生长
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
5*10^5
2) 细胞鉴定:卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3) 经鉴定细胞纯度高于90%。
4) 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5) 细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。
Kit 小鼠孤腓肽 96T
NGF- Beta(Human Nerve growth factor- Beta) ELISA kit 人的神经生长因子-β 96T
MIP-3 Beta/ELC/CCL19(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Beta) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3β 96T
PP(Mouse Protein Phosphatase) ELISA Kit 小鼠蛋白磷酸酶 96T
BrdU ELISA Kit 大鼠溴脱氧核苷尿嘧啶 96T
MIP-3 Alpha/CCL20(Human Macrophage Inflammatory Protein-3 Alpha) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白3α 96T
TGF Beta2 ELISA Kit 大鼠转化生长因子β2 96T
TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧还蛋白还原酶 96T
Trx(Mouse thioredoxin) ELISA Kit 小鼠硫氧化还原蛋白 96T
MIP-1 Beta/CCL4(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Beta) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白1β 96T
CYP2E1 ISA Kit 大鼠细胞色素P4502E1 96T
Alpha1-MG ELISA Kit 大鼠α1微球蛋白 96T
MIP-1 Alpha/CCL3(Human Macrophage Inflammatory Protein-1 Alpha) ELISA kit 人巨噬细胞炎性蛋白1α 96T
Collagenase II(Mouse Collagenase Type II) ELISA Kit 小鼠胶原酶II 96T
Collagenase I(Mouse Collagenase Type I) ELISA Kit 小鼠胶原酶I 96T
MDC/CCL22(Human Macrophage-Derived Chemokine) ELISA kit 人巨噬细胞来源的趋化因子 96T
MCP-4/CCL13 ELISA Kit 大鼠单核细胞趋化蛋白4 96T
PPAR- Alpha ELISA Kit 大鼠过氧化物酶体增殖物激活受体α 96T
M-CSF(Human Macrophage Colony-Stimulating Factor) ELISA kit 人巨噬细胞集落刺激因子 96T
胆囊动脉内皮细胞P-PKC(Mouse phospho Protein Kinase C) ELISA Kit 小鼠磷酸化蛋白激酶C 96T
MIC-1 human ELISA kit 人巨噬细胞抑制因子-1 ELISA 试剂盒 96T
MCP-3/CCL7(Human monocyte chemotactic protein 3) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白3 96T
pERK(Mouse phospho-extracellular signal-regulated kinase) ELISA Kit 小鼠磷酸化细胞外信号调节激酶 96T
CAM ELISA Kit 大鼠钙调素 96T
CCB(Mouse calcium channel blockers) ELISA Kit 小鼠钙通道阻滞剂 96T
Apo-E ELISA Kit 大鼠载脂蛋白E 96T
MCP-2/CCL8(Human monocyte chemotactic protein 2) ELISA kit 人单核细胞趋化蛋白2 96T
MCP-1/CCL2/MCAF(Human monocyte chemotactic protein 1/monocyte chemotactic and 细胞传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
细胞复苏步骤: 将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
细胞冻存步骤:
待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面T25瓶为例; 1.细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入2ml完全培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2.1000RPM离心5分钟去掉上清。用血清重悬浮,加DMSO至最终浓度为10%。加入DMSO后迅速混匀,按每1ml的数量分配到冻存管中,注意冻存管做好标识。本公司按每个冻存管细胞数目大于1X106个细胞冻存。
3.将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。运输和保存视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1) 1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2) T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
注意事项:
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
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文献和实验thx221 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关的最新研究文献!我实在是找不到这方面的最新研究进展,大家帮个忙吧!先谢谢了!!! 编年张 加此QQ492207858 chuckdouble thx221 wrote: 有没有哪位大侠做内皮细胞方面的信号转导的???帮忙给提供几个通路做参考!或者给我点相关
hbsyliuyang rt 请不吝赐教 感谢! david_xmu 没什么太大的区别,另外内皮细胞在不同的培养基中培养可能会有形态上的区别 hbsyliuyang 谢谢这位达人! 拜 本文由丁香园论坛提供,想了解更多有用的、有意思的前沿资讯以及酷炫的实验方法的你,都可以成为师兄的好伙伴 师兄微信号:shixiongcoming
正常人脐静脉原代内皮细胞培养一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplem e nt2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 ) + 1% P/S4、染色液: 0.4% Trypan Blue5、消化液: PriCells Isolation of Primary Cell Kit6、检测试剂:抗人
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