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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
100
- 细胞类型:
贴壁生长
- 物种来源:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 细胞形态:
成纤维细胞
- 运输方式:
电询
- 年限:
详见说明书
- 生长状态:
详见说明书
- 规格:
5*10^5
用途:可用于科研实验培养某一类型细胞没有固定的培养条件。
蛋白96 96T
AhCGAb(Human anti-chorionic gonadotropin-antibody) ELISA Kit 人抗染色体抗体 96T
CH50(Mouse 50% complement hemolysis)ELISA Kit 小鼠血清总补体 96T
ABAb(Human anti-brain tissue antibody) ELISA Kit 人抗脑组织抗体 96T
IL-1 Beta ELISA Kit 大鼠白介素1β 96T
AGA(Human anti-gliadin antibody) ELISA Kit 人抗麦胶蛋白/麦醇溶蛋白抗体 96T
B7-2/sCD86(Mouse soluble Cluster of differentiation 86)ELISA Kit 小鼠可溶性CD86 96T
MYO/MB ELISA Kit 大鼠肌红蛋白 96T
INS(Mouse Insulin)ELISA Kit 小鼠胰岛素 96T
APSA(Human Anti-phosphatidyl serine antibody) ELISA Kit 人抗磷脂酰丝氨酸抗体 96T
TXB2 ELISA Kit 大鼠血栓素B2 96T
TA(Human anti-teichoic acid antibody) ELISA Kit 人抗磷壁酸抗体 96T
HIF-1 Alpha(Mouse hypoxia-inducible factor 1 Alpha)ELISA Kit 小鼠低氧诱导因子1α 96T
Ach ELISA Kit 大鼠乙酰胆碱 96T
ALA/LCA(Human anti-lymphocytotoxic antibody) ELISA Kit 人抗淋巴细胞毒抗体 96T
NN-T4(Mouse Neonatal Thyroxine)ELISA Kit 小鼠新生甲状腺素 96T
TRH ELISA Kit 大鼠促甲状腺素释放激素 96T
ATGA/TGAB ELISA Kit 大鼠抗甲状腺球蛋白抗体 96T
Human anti-macrophage antibody ELISA Kit 人抗巨噬细胞抗体 96T
胃成纤维细胞Amylin(Mouse Amylin) ELISA Kit 小鼠胰淀素 96T
TPO-Ab(Human anti-Thyroid-Peroxidase antibody) ELISA Kit 人抗甲状腺过氧化物酶抗体 96T
Free-T3(Mouse Free Tri-iodothyronine Indes) ELISA Kit 小鼠游离三碘甲状腺原氨酸 96T
CRH ELISA Kit 大鼠促肾上皮质激素释放激素 96T
LTC4(Mouse Leukotriene C4) ELISA Kit 小鼠白三烯C4 96T
GnRH ELISA Kit 大鼠促性腺激素释放激素 96T
RBC(Human anti-red cell antibody) ELISA Kit 人抗红细胞抗体 96T
28S rRNP(Human 28S ribosome RNP antibody) ELISA Kit 人28S抗核糖体抗体 96T
LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4 96T
Cyt-C(Mouse Cytochrome-C) ELISA Kit 小鼠细胞色素C 96T
ANA(Human anti-nucleolus antibody) ELISA Kit 人抗核仁抗体 96T
LIFR ELISA Kit 大鼠白血病抑制因子受体 96T
FT4(Mouse Free Thyroxine) ELISA Kit 小鼠游离甲状腺素 96T
Ang- I (Mouse angiotension I ) ELISA Kit 小鼠血管紧张素Ⅰ 96T
gp210(Human Anti-glucoprotein 210) ELISA Kit 人抗核膜糖蛋白210抗体 96T
EGF ELISA Kit 大鼠表皮生长因子 96T
MC Ab(Mouse melanocyte antibody) ELISA Kit 小鼠黑色素细胞抗体 96T
LC1(Human anti-liver cytosolantibody type 1) ELISA Kit 人抗肝细胞胞质1型抗体 96T
iFABP ELISA Kit 大鼠肠脂肪酸结合蛋白 96T
TE ELISA Kit 大鼠端粒酶 96T
ABM-Ab(Human alveoli basement membrane zone antibody) ELISA Kit 人抗肺泡基底膜抗体 96T
T4(Mouse thyroxine) ELISA Kit 小鼠甲状腺素 96T
MMP-5 ELISA Kit 大鼠基质金属蛋白酶5 96T
DPP IV (Mouse dipeptidyl peptldase IV ) ELISA Kit 小鼠二肽基肽酶Ⅳ 96T
ATG(Human anti-thymocyte globulin) ELISA Kit培养操作
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识 3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
注意事项:
1. 收到细胞后先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们,信息确认后我们为您再免费寄送一次。
4. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件。
5. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。
6. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
实验步骤:
1. 将解剖用的剪刀、镊子和刀片进行无菌消毒。
2. 将怀孕小鼠用颈椎脱位法处死,将其固定在解剖板上。
3. 用70%乙醇喷洒在小鼠的腹部进行消毒,用一把剪刀和一把镊子把孕鼠外皮剪开,用另外一把剪刀和一把镊子把内皮剪开,露出子宫,最后用第三把剪刀和镊子将子宫小心取出放在盛有PBS的玻璃平皿中,冲洗去血。
4. 用两把弯镊子将胚胎外的胞膜小心去除,然后夹掉头和内脏,将其余胚胎转移到一个装有30 mLPBS的50 mL离心管中,轻轻颠倒两次,倒掉PBS,再重复此步骤一次,留少许PBS,将胚胎转移到另一装有PBS的平皿中,用手术刀片将其切碎至可用微量移液器吸取。
5. 用200μL的微量移液器反复快速吹打平皿中的液体,放在15 mL离心管中,
4℃ 1500 r/min离心5 min,倒掉上清液,加10 mL胰蛋白酶,重悬沉淀,37℃水浴中消化30 min,且每隔5 min轻轻晃动,使之充分消化。
6. 将上层细胞悬液倒入一装有10 mL DMEM培养基的50 mL离心管中,用200目尼龙滤网过滤后,1 500 r/min离心5 min,弃去上清液。
7. 用移液管吸取30 mL DMEM培养基,让培养液沿离心管壁缓缓流入管底,1 500 r/min离心5 min,弃掉上清液。重复一次此步骤。 8. 将细胞沉淀用15 mL培养基悬起。细胞计数(8只14天胎鼠可获得(2~3)×107个细胞)。
9. 将3×106个细胞悬浮于15 mL含10%小牛血清的DMEM培养基中,接种到200 mL的培养瓶中。
10. 24 h后更换新鲜的含10%小牛血清的DMEM培养基。
11. 细胞长满后,弃掉培养基,用PBS小心冲洗,倒掉,加胰蛋白酶消化。
12. 轻轻晃动细胞培养瓶,见有细胞浮起,立即加入2 mL血清终止消化,用移液管把细胞轻轻悬起,混匀,使细胞成为单细胞悬液。
13. 1500 r/min离心5 min。弃掉上清液。加入10 mL含小牛血清的DMEM培养基,悬起细胞,按1:5传代。
14. 细胞再次长到覆盖率80%~90%,将其消化后,常规冻存(冻存液要现配)。
15. 实验结果:可拍照存留。
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文献和实验胃腺。根据其所在部位与结构的不同,分为胃底腺、贲门腺和幽门腺。胃腺之间及胃凹之间有少量结缔组织,其纤维成分以网状纤维为主,细胞成分中除成纤维细胞外,还有较多淋巴细胞及一些浆细胞、肥大细胞与嗜酸性粒细胞等。此外,尚有丰富的毛细血管以及由粘膜肌伸入的分散的平滑肌纤维。 (1)胃底腺(fundic gland):分布于胃底和胃体部,约有1500万个,是数量最多、功能最重要的胃腺。腺呈分支管状,可分为颈、体与底部。颈部短而细,与胃小凹衔接;体部较长;底部略膨大,伸至粘膜肌层。胃底腺由主细胞
,胃中部称胃体,近幽门处称幽门部(幽门窦与幽门管),胃空虚时,粘膜形成许多皱襞,在小弯处多为纵行,约 4~ 6条。 胃壁结构 分四层:粘膜层、粘膜下层、肌层和浆膜层。 粘膜层 上皮为单层柱状上皮。胃腺由胃粘膜上皮凹陷而成。贲门部和幽门部的胃腺由粘液细胞组成。能分泌粘液。其中不含消化酶。 固有膜(粘膜下层)为类似网状组织的结缔组织,含胶原纤维,血管与多种细胞,如淋巴细胞、浆细胞、成纤维细胞和散在的平滑肌,固有膜内充满腺体
〔 1〕脊椎动物的消化管,其接连食道的膨大部分,称为胃。低等脊椎动物中有很多没有胃。哺乳类的胃位于横膈膜下的腹腔中,一般食物在胃中停留一段时间再行消化。胃肠的交界处为幽门,当食物停留在胃中时幽门关闭。胃与食道的交界处为贲门。胃在体腔中,外有浆膜覆盖,通过胃系膜( mesogastri-um)与体腔壁相连。从组织学来看,胃的一部或全部与食道一样,有的也都是由多层扁平上皮所覆盖,只不过是具有少量的胃液腺,但一般是由单层柱状上皮所构成,具有与肠相似的构造。哺乳类的胃,上部
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