链霉亲和素 Streptavidin 9013-20-1

链霉亲和素 9013-20-1 链霉亲和素 9013-20-1 名称：链霉亲和素 9013-20-1 链霉亲和素 9013-20-1 货号：YT2040 英文名称：Streptavidin链霉亲和素 品牌：伊塔生物 CAS:9013-20-1 规格：1mg，

英文名称	Streptavidin
CAS	9013-20-1
储存条件	-20℃
规格	1mg ; 10mg
单位	支
有效期	1年

链霉亲和素说明书

规格：1mg/10mg/100mg

英文名称：Streptavidin

产品来源：大肠杆菌。

分子量：约64KDa，为四聚体形式。

建议用途∶链霉亲和素-生物素系统用于生物反应检测；偶联磁珠

基础组分∶20mM PB 100mM NaCl pH7.4；不含防腐剂。

保存条件：-20℃干燥保存，有效期至少保持1年。

产品说明：

链霉亲和素（streptavidin，以下简称SA）是与亲和素有相似生物学特性的一种蛋白质，在生理状态下为四聚体形式，一分子链霉亲和素能够与四分子生物素结合，但链霉亲和素不含糖基，非特异性结合远比亲和素低。基于链霉亲和素与生物素之间的高亲和力及多级放大效应，链霉亲和素-生物素系统目前广泛应用于生物反应检测领域。

本公司生产的链霉亲和素为经过基因重组，在大肠杆菌中表达，并采用亲和纯化所得的重组蛋白产品。ELISA实验结果表明，重组链霉亲和素能够与biotin标记抗体较好结合，生物活性大于15U/mg(IU的定义为每毫克SA能够结合的biotin的微克数)。

使用方法：（仅供参考，具体实验步骤可根据实验需求进行调整。）

1. 微孔板包被

1) 用碳酸钠缓冲溶液（pH 9.6）溶解冻干粉，将浓度稀释成 3-10ug/ml（客户可设定梯度进行实验）

注意：SA 等电点是 6.0。

2) 用移液器吸取 100ul/孔，4℃过夜包被或者 37℃包被 3h；

3) 洗涤：倒尽板孔中液体，加 200ul 洗涤液，静放三分钟，反复三次，最后将反应板倒置在吸水纸上，使孔中洗涤液流尽，扣干。

4) 后续进入封闭、洗涤、抗原抗体结合流程。

5) 若不立即进入下游实验，包被板需要进行烘干保存时。包被前，将包被液中加入 20%蔗糖作为活性保护剂。

2. 偶联磁珠（以羧基磁珠为例）

A．磁珠表面羧基活化

1. 混匀磁珠后，取 100 µL 羧基磁珠到 1 mL 离心管中，磁性分离去除上清液，用 200 µL MEST溶液（100 mM MES，pH 5.0，0.05% Tween 20）进行磁性分离洗涤 2 次，然后移除上清液；

2. 迅速加入新鲜配制的 100 µL EDC 溶液（10 mg/mL，以上述 MEST 溶液作分散剂）和 100 µL NHS（10 mg/mL，以上述 MEST 溶液作分散剂）溶液到装有磁珠的离心管中，漩涡混匀使磁珠充分悬浮， 25℃活化 30 min，该期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）；经过上述步骤之后，磁珠表面的羧基已经活化，可以与带有伯氨基的生物配体进行共价偶联。（活化状态不宜长时间保存，建议立即进行偶联）。

B．磁珠与生物配体的共价偶联

1. 磁性分离去除上清液，加入 50 µg~200 µg 生物配体（合适用量及浓度需要根据具体实验进行优化，保持溶液 pH≈8.0，可加入 0.05% Tween 20 以提高磁珠分散性，避免缓冲体系中存在除生物配体以外含有伯氨基的试剂），轻柔地混匀；

2. 25℃偶联 2 h，或 25℃偶联 1 h 后放置 4℃静置过夜，偶联期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）；

3. 离心管置于磁性分离架上磁性分离去除上清液，加入 200 µL PBST 溶液（pH 7.2，且含1%BSA）重悬磁珠（可根据需要进行超声），25℃反应 1 h 封闭磁珠表面未反应的活化羧基基团，该期间保持磁珠的悬浮状态（可利用垂直混合仪进行颠倒混匀）；

4. 离心管置于磁性分离器上磁性分离去除上清液，每次用 200 µL PBS 溶液（pH 7.2）或保存溶液洗涤 3 次后， 重新悬浮于保存溶液中（可根据需要来确定保存溶液的加入量，以调整偶联配体磁珠的浓度），保存于 4℃。如果固定的生物配体稳定，可以在保存溶液中加入 0.02%（w/v）（NaN₃）作为抑菌剂。

注意事项：

1. 本品仅供科研实验用，不得用于其它。

2. 避免反复冻融，建议分装成小包装后分别冻存。

3. 溶解后立即使用效果最好，不能 4°C 长期存放。

4. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。