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- 保存条件:
ITTABIO
- 保质期:
3年
- 英文名:
Lysozyme溶菌酶
- 库存:
55
- 供应商:
北京伊塔生物科技有限公司
- CAS号:
12650-88-3
- 规格:
1g
说明: 生化研究;溶菌酶可用于水解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁。溶菌酶对革兰氏阳性菌、好气性孢子形成菌、枯草杆菌、耐辐射微球菌均有良好的分解作用,对大肠杆菌、普通变球菌和副溶血性弧菌等革兰氏阴性菌也有一定程度的溶解作用。溶菌酶具有分解细菌细胞壁中肽聚糖的特殊作用。
来源于:鸡蛋清
溶菌酶(来源于鸡蛋清) 保存:2-8℃,密封 有效期:4 年 产品参数 CAS : 12650-88-3 外观性状:白色至类白色粉末 酶活/效价:2 万 U/mg 酶活定义:一个 F.I.P.(U)溶菌酶单位相当于在最适条件下于 450nm 处每分钟使吸光度降低 0.001 所需的酶量。 溶解性:50mg/ml H2O 产品说明: 溶菌酶是一种糖苷水解酶,具有生物活性,由 18 种 129 个氨基酸残基组成,具有 4 个 S-S 键, 分子量为 14 307Da。可用于水解革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的细胞壁。溶菌酶对革兰氏阳性菌、 好气性孢子形成菌、枯草杆菌、耐辐射微球菌均有良好的分解作用,对大肠杆菌、普通变球菌和副溶 血性弧菌等革兰氏阴性菌也有一定程度的溶解作用。溶菌酶具有分解细菌细胞壁中肽聚糖的特殊作 用,pI 为 11.0-11.35。在酸性介质中可稳定存在,碱性介质中易 失活。易受重金属离子(Fe 3+、Cu 2+、Hg +、Pb +等)和氧化剂的抑制及破坏作用,在贮存或使用过 程中应避免与之接触。 使用条件: 鸡蛋清溶菌酶作为溶菌酶类的典型代表,是一种稳定的蛋白质,其最适 pH 为 4-6.5,最适温度 为 35℃,酶的最适添加量必须按照具体情况而定。
一.常用贮液与溶液配置方法
- 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
- 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。
- 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。
- 10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性,
- 须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
- 1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。
- 8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。
- 3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。
- 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA·2H2O和20g的NaOH,并溶于水中,定容至1L。
- 1mol/L HEPES:将23.8gHEPES溶于约90ml的水中,用NaOH调pH(6.8-8.2),然后用水定容至100ml。
- 1mol/L HCl:加8.6ml的浓盐酸至91.4ml的水中。
- 25mg/ml IPGT:溶解250mg的IPGT(异丙基硫代-β-D-半乳糖苷)于10ml水中,分成小份贮存于-20℃。
- 1mol/LMgCl2:溶解20.3g MgCl2·6H2O于足量的水中,定容到100ml。
- 20mg/ml蛋白酶K(proteinase K):将200mg的蛋白酶L加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
- 10mg/mlRnase(无DNase)(DNase-free RNase):溶解10mg的胰蛋白RNA酶于1ml的10mmol/L的乙酸钠水溶液中(pH 5.0)。溶解后于水浴中煮沸15min,使DNA酶失活。1mol/L的Tris-HCl调pH至7.5,于-20℃贮存。(配制过程中要戴手套)
- 10%SDS(十二烷基硫酸钠):称取100gSDS慢慢转移到约含0.9L的水的烧杯中,用磁力搅拌器搅拌直至完全溶解。用水定容至1L。
- 2mol/L山梨(糖)醇(Sorbitol):溶解36.4g山梨(糖)醇于足量水中使终体积为100ml。
- 2.5% X-gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-半乳糖苷):溶解25mg的X-gal于1ml的二甲基甲酰胺(DMF),用铝箔包裹装液管,贮存于-20℃。
电泳缓冲液
50×Tris-乙酸(TAE)缓冲液
成分及终浓度 配制1L溶液各成分的用量
2mol/L Tris碱 1mol/L 乙酸 100 mmol/L EDTA 水 242g 57.1 ml的冰乙酸(17.4 mol/L) 200ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L
5×Tris-硼酸(TBE)缓冲液
成分及终浓度配制1L溶液各成分的用量
445 mmol/L Tris碱 445 mmol/L 硼酸盐 10 mmol/L EDTA 水 54g 27.5g 硼酸 20 ml的0.5 mol/L EDTA(pH 8.0) 补足1L
染料
1%溴酚蓝(bromophenol blue)
加1g水溶性钠型溴酚蓝于100ml水中,搅拌或涡旋混合直到完全溶解。
1%二甲苯青FF(xylene cyanole FF)
溶解1g二甲苯青FF于足量水中,定容到100ml。
10mg/ml的溴化乙锭(ethidium bromide)
小心称取1g溴化乙锭,转移到广口瓶中,加100ml水,用磁力搅拌器搅拌直到完全溶解。用铝箔包裹装液管,于4℃贮存。
凝胶上样液(gel loading solutions)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 15%聚蔗糖(400型) 水 1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 1.5g 补足到10ml
6×溴酚蓝/二甲苯青/聚蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.25%溴酚蓝 0.25%二甲苯青FF 15%聚蔗糖(400型) 水 2.5ml 1%溴酚蓝 2.5ml 1%二甲苯青FF 1.5g 补足到10ml
6×甘油凝胶上样液(4℃贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 50%甘油 水 1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 3ml 3.9ml
6×蔗糖凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.15%溴酚蓝 0.15%二甲苯青FF 5 mmol/L EDTA 40%聚蔗糖 水 1.5ml 1%溴酚蓝 1.5ml 1%二甲苯青FF 100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 4g 补足到10ml
10×十二烷基硫酸钠/甘油凝胶上样液(室温贮存)
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量
0.2%溴酚蓝 0.2%二甲苯青FF 200 mmol/L EDTA 0.1%SDS 50%甘油 水 20mg 20mg 4ml 0.5mol/L EDTA(pH8.0) 100ul 10% SDS 5ml 补足到10ml
三、常用抗生素配置方法
1. 氨苄青霉素(ampicillin)(100 mg/ml)
溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
2. 羧苄青霉素(carbenicillin)(50mg/ml)
溶解0.5g羧苄青霉素二钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
3. 甲氧西林(methicillin)(100mg/ml)
溶解1g甲氧西林钠于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以37.5ug/ml终浓度与100ug/ml氨苄青霉素一起添加于生长培养基。
4. 卡那霉素(kanamycin)(10mg/ml)
溶解100mg卡那霉素于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
5. 氯霉素(chloramphenicol)(25mg/ml)
溶解250mg氯霉素足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以12.5ug/ml~25ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
6. 链霉素(streptomycin)(50mg/ml)
溶解0.5g链霉素硫酸盐于足量的无水乙醇中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
7. 萘啶酮酸(nalidixic acid)(5mg/ml)
溶解50mg萘啶酮酸钠盐于足量的水中,最后定容至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以15ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
8. 四环素(tetracyyline)(10mg/ml)
溶解100mg四环素盐酸盐于足量的水中,或者将无碱的四环素溶于无水乙醇,定容至10ml。分装成小份用铝箔包裹装液管以免溶液见光,于-20℃贮存。常以10ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养基。
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文献和实验溶菌酶 溶菌酶(1ysozyme)因具有溶菌活性而得名。根据作用对象,分为细菌胞壁溶菌酶和真菌胞壁溶菌酶;根据来源,分为人、动物、植物和微生物溶菌酶。人溶菌酶检出于泪液、唾液、乳汁等,由M中组成性地产生。动物中的溶菌酶以鸡蛋清中含量最高,是溶菌酶的代表。鸡蛋清溶菌酶属于一种稳定的碱性蛋白,由129个氨基酸残基组成,分子质量为14kDa。 溶菌酶可直接作用于革兰阳性菌胞壁裸露的肽聚糖。肽聚糖由三种成分共同构成立体网状结构,即N-乙酰
CD88 分子 CD88 常用单克隆抗体或代号: S5/1,W17/1;(C5aR) 主要表达细胞: My [M] 分子质量(kDa)和结构: gp40 功 能: 补体C5a受体,刺激脱颗粒 CD88 Summary: receptor for C5a, the chemotactic and inflammatory peptide anaphylatoxin
一种低分子量( 14700道尔顿)的、不耐热的碱性蛋白质,其中富含精氨酸。人体内许多组织及体液中都含有溶菌酶,以乳汁、唾液、肠道以及吞噬细胞溶酶体颗粒中含量较多,组织中含量较少。正常的尿液、汗液及脑脊液中不含溶菌酶。溶菌酶能直接水解革兰氏阳性菌细胞壁中乙酰葡糖胺与乙酰胞壁酸分子间的连接,使细胞壁破坏,水分进入,细胞崩解。而革兰氏阴性菌细胞壁粘肽层外有一层脂多糖和脂蛋白,故不受溶菌酶的影响。在抗体存在下,脂多糖及脂蛋白受到破坏时,溶菌酶才能发挥作用;在有抗体、补体、溶菌酶
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