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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 品系:
详见说明书
- ATCC Number:
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4B
- 细胞类型:
A类
- 肿瘤类型:
详见说明书
- 供应商:
上海西格
- 库存:
35
- 生长状态:
贴壁生长
- 年限:
详见说明书
- 运输方式:
电询
- 器官来源:
详见说明书
- 是否是肿瘤细胞:
否
- 细胞形态:
详见说明书
- 免疫类型:
详见说明书
- 物种来源:
详见说明书
- 相关疾病:
详见说明书
- 组织来源:
ATCC
- 英文名:
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4B
- 规格:
详见说明书
| 产品名称 | 中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4B |
| 生长特性 | 贴壁生长 |
| 货号 | XG-X18212 |
形态特性 上皮细胞样
生长特性 贴壁生长
特征特性 CHO-HCV-NS4B细胞整合有丙型肝炎病毒的NS4B基因,能稳定表达NS4B蛋白,是HCV基础研究的极好摸型。它由武汉大学病毒学国家重点实验室郭佳博士于2008年构建并保存。
培养条件 DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
传代方法 1:3传代,2-3天传一代
传代情况 C20
冻存条件 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 阴性
STR
同工酶
染色体
使用权限 A类
细胞的种类:
产品仅用于科研第一种:
是冻存产品,由液氮直接拿出,干冰运输给客户。一般不推荐这种,也较少使用这种方式,因为复苏手法对于细胞状态影响较大,一旦细胞状态不好,很难说是细胞自身不行,还是复苏没操作好;另外温度对细胞、基因功能状态影响很大,也不是细胞储存的zui好方式,快递时间也很难控制,多种因素影响产品的质量;干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种:
是我们复苏好细胞,QC通过后,T-25灌满培养基常温运输给客户,排除复苏造成影响,常温运输也对细胞影响也不大,只需加25元运费(顺丰)。
质量保证:我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,购买到货后,由我们实验室扩增、冻存,冻存的产品全部经过QC检测,100%进口来源,100%保证5代以内,活力>95%,无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作,不同的实验室采用的方法略有差异,但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO,货号21875-091),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
脑微血管内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)柠檬酸三钾一水Potassium tribasic, monohydrate质量规格:>99%,BR
Raji细胞,人Butt`s瘤细胞 C57小鼠色素瘤瘤株,ME细胞 人肾近曲小管上皮细胞裂解物HRPTEpiCLL-焦谷氨酸;氧脯氨酸H-Pyr-OH质量规格:>98%,BR
NCI-H23(人非小细胞肺癌细胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-L-焦谷氨酸Z-Pyr-OH质量规格:>98%,BR
CCD-1095Sk(人浸润性导管癌旁皮肤细胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0078EL4(小鼠瘤细胞)5×106cells/瓶×2 615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615DL-m-酪氨酸DL-m-Tyrosine质量规格:0.98
犬肾细胞;MDCK(NBL-2)肌氨酸甲酯盐酸盐H-Sar-OMe·HCl质量规格:BR,98%
非洲绿猴肾细胞系/IgR;VERO/IgR 大鼠肝癌细胞,CBRH-7919细胞 BEL-7405(肝癌细胞)癸二酸二乙酯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))质量规格:Standard for GC, ≥99.5% (GC)Diethyl sebacate
人癌细胞;MCF7二十二烷(standard for GC,≥99.0%(GC))质量规格:standard for GC,≥99.0%(GC)Docosane
TNFRSF4 Others Human 人 TNFRSF4 / CD134 人细胞裂解液 (阳性对照) 二甲基亚砜(AR,>99%(GC))质量规格:AR,>99%(GC) Dimethyl sulfoxide
CM-H109人破骨细胞完全培养基100mL二甲基亚砜(>99.8%(GC))质量规格:>99.8%(GC) Dimethyl sulfoxide
ANGPTL2 Others Mouse 小鼠 ANGPTL2 / Angiopoietin-like 2 人细胞裂解液 (阳性对照) 二甲基亚砜(分子生物学专用,≥99.9%)质量规格:分子生物学专用,≥99.9% Dimethyl sulfoxide
大鼠垂体瘤细胞;GH3N,N-二去乙基舒尼替尼盐酸盐质量规格:美国进口N,N-Didesethyl Sunitinib Hydrochloride
F11 Others Human 人 F11 / FXI 人细胞裂解液 (阳性对照) 舒尼替尼-d10质量规格:美国进口Sunitinib-d10
上皮细胞生长添加物-2EpiCGS-2他克莫司-13C,D2(主要的)质量规格:美国进口FK-506-13C, D2 (Major)
CTNNB1 Others Human 人 beta-Catenin / CTNNB1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 24,32-双-O-(tert-butyldimethylsilyl)-他克莫司质量规格:美国进口24,32-Bis-O-(tert-butyldimethylsilyl)-FK-506
人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]N-去乙基米那普仑质量规格:美国进口N-Desethyl Milnacipran
中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);CHO-HCV-NS4B大鼠纤维细胞(RLF)(5×105) BPH-1, 人前列腺增生细胞 Human羟脯酸测试前处理试剂shēng huà shì jì容量:RT25支/包
大额牛皮肤成纤维样细胞;BOS-1聚季铵盐-10 Polyquaternium-10 68610-92-4 5G 通用试剂
人肾脏上皮细胞(HREpiC)( 5×105 )醋异务酯;醋醋务酯;醋醋异务酯;香蕉水;香蕉油;异务酯 IsocMyl ccqtctq;γ-Mqthylbutyl qthcnoctq;Bcncnc oil;cMyl ccqtctq;Pqcr oil;3-Mqthyl-1-butcnol ccqtctq 13-9-
CL-0187PK-15(猪肾细胞)5×106cells/瓶×2十八酸乙酯,英文名或英文缩写:etxyl stearate,级别:LR,95%,规格:5克
人结直肠腺癌细胞;HCT-15 [HCT15] 大鼠神经小胶质细胞完全培养基 100mL(两性霉素B)
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色
,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
细胞处理:
1)复苏细胞产品名称:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二:可选择半数换液方式,弃去半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时,应将细胞收集,1000RPM,常温条件下离心5分钟,少量保存上清液(防止细胞吸走),加入部分新鲜培养基,吹打均匀后,加入到冻存管中,在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1)细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基,其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化,可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。
2)冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基,含10% DMSO,适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
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文献和实验为非溶性蛋白,也可被单克隆抗体柱层析,重新还原的产物可以被抗Derpl血清识别,其结合率优于pGEX克隆产物。为了减少繁琐,表达更好的重组蛋白,有人尝试以Der p1的原酶和酶原放人同一酵母载体表达,效果良好。 3.哺乳动物表达 构建一个扩大的载体PEE6.HCMV.GS,从中国仓鼠卵巢细胞(CHO)表达Derpl和Derp2。人巨细胞病毒(CMV)启动子(ACMD)和谷胱甘肽合成酶基因,通过放大质粒拷贝数增加细胞内酶高效表达,以控制抗代谢产物硫代
分子生物学、分子免疫学等学科的发展使基因工程疫苗具有越来越重要的地位。在基因工程疫苗研究的动物细胞表达系统中,最具代表性的就是中国仓鼠卵巢细胞(Chinese Hamster Ovary,CHO)。它是用来表达外源蛋白最多也最成功的一类细胞。本文就CHO细胞表达系统在疫苗研制中的应用做一综述。1、CHO细胞表达体系及其特点 CHO细胞属于成纤维细胞,既可以贴壁生长。也可以悬浮生长。目前常用的CHO细胞包括原始CHO和二氢叶酸还原酶双倍体基因缺失型(DHFR-)突变株CHO。近年来,为降低
。 ⑸UltraCHOTM培养基 UltraCHOTM培养基最适于培养转染和未转染的中国仓鼠卵巢细胞(CHO)细胞,表达重姐蛋白质。UltraCHOTM培养基以一种改良的DMEM培养基(F-12)为基础,在此基础上添加胰岛素,转铁蛋白以及专利性的纯化蛋白等成分而成。有UltraCHO液体培养基(1X)和干粉培养基(含冷冻添加剂)两种类型的产品可供选择,培养基蛋白含量低于300ug/ml. 应用:培养CHO细胞; 重组蛋白的合成。 ⑹ProCHOTMCDM系统 ProCHO限定培养
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