大鼠脑胶质瘤细胞；C6

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

订购信息：
 

产品名称	大鼠脑胶质瘤细胞；C6
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X18165

细胞名称    大鼠脑胶质瘤细胞；C6
形态特性  成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  胶质细胞株C6是由Benda等用N-nitrosomethylurea诱导的大鼠胶质瘤克隆，并经过一系列的体外培养和动物传代交替后建成的。 当细胞从低密度生长到满瓶时，S-100产量增加10倍。
培养条件  F12K  马血清，15%；优质胎牛血清，2.5%
传代方法  消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(38+5)
冻存条件  完全培养基+8%DMSO
支原体检测 阴性　
STR
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
非洲绿猴肾细胞;VERO1,3-(Standard for GC,≥99.5%(GC))1,3-Propanediol质量规格：Standard for GC,≥99.5%(GC)
ITK Others Mouse 小鼠 ITK Kinase (aa 351-619) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) α-蒎1(Standard for GC,≥99.0%)(−)-α-Pinene质量规格：Standard for GC,≥99.0%
CL-0193RD(人恶性胚胎横纹肌瘤细胞)5×106cells/瓶×21,2,3,4-四氢萘(THN)(标准品)1,2,3,4-Tetrahydronaphthalene质量规格：分析标准品,≥99.5%(GC)
MDA-MB-231(ATCC来源), 人癌细胞 人胚肾T细胞，293T细胞 P19(畸胎癌细胞)1酸三甲酯(标准品)Trimethyl phosphate质量规格：分析标准品
人食管癌细胞;EC1091酸三辛酯(标准品)Tri(2-ethylhexyl)phosphate质量规格：分析标准品
IL33 Protein Human 重组人 IL33 / Ierleukin-33 / NF-HEV 蛋白盐酸诺拉曲噻质量规格：>99%,BR,可用于细胞培养 Nolatrexed dihydrochloride
PC-3M-2B4(人前列腺癌低转移细胞株) 5×106cells/瓶×2 CHO/dhFr-(中国仓鼠二氢叶酸还原酶缺陷细胞)PD 173074质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养PD 173074
CL-0253A-427(人肺癌细胞)5×106cells/瓶×2PH-797804质量规格：>98%,BR,可用于细胞培养PH-797804
PGF Others Mouse 小鼠 PIGF / PLGF 人细胞裂解液 (阳性对照) Celite硅藻土，酸洗(用于总膳食纤维含量分析,TDF-100A)质量规格：用于总膳食纤维含量分析,TDF-100ACelite, acid-washed
人膀胱平滑肌细胞cDNAHBdSMC cDNACelite® 硅藻土545(助滤剂,通量煅烧（filter aid,flux calcined）)质量规格：助滤剂,通量煅烧（filter aid,flux calcined）Celite® 545
EFNA5 Others Human 人 EphrinA5 人细胞裂解液 (阳性对照) (R)-(+)-氨鲁米特质量规格：美国进口(R)-(+)-Aminoglutethimide
人食道上皮细胞总RNAHEEpiC NAS-(-)-氨鲁米特L-1酸盐质量规格：美国进口S-(-)-Aminoglutethimide L-Tartrate Salt
TNFRSF13C Others Rat 大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 人细胞裂解液 (阳性对照) R-(+)-氨鲁米特L-1酸盐质量规格：美国进口R-(+)-Aminoglutethimide L-Tartrate Salt
叙利亚仓鼠肾细胞;BHK-212-羟基-氟他胺质量规格：美国进口2-Hydroxy-flutamide
PC-2细胞，人胰腺癌细胞 人皮肤癌细胞系,HS-4细胞 小鼠色素瘤瘤株;B16(S)-(-)-O-去甲卡维地洛质量规格：美国进口(S)-(-)-O-Desmethyl Carvedilol
大鼠脑胶质瘤细胞；C6非洲绿猴肾细胞;GL-37 鼻咽癌细胞，CNE细胞 AsPC-1(转移胰腺腺癌细胞)Pyridoxalxy7nochloride吡哆醛盐酸盐25克AR
EB病毒转化的人B细胞;HH-01溴代正炳烷 1-Bromopropcnq 106-94-2
TNFRSF10B Others Mouse 小鼠 AILR2 / TNFRSF10B 人细胞裂解液 (阳性对照) 基本基硅烷 MqTHYLPHqNYLSILcNq 766-08-2
CM-R061大鼠肾动脉平滑肌细胞完全培养基100mLPHⅢ三号凝聚剂500毫克AR，90%
CD3E & CD3G Others Human 人 CD3E & CD3G Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 4264-83-94-硝基本1酸二钠(2-8°C)Diwo7ium 4-nitnopxenylphosphate
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。