倍赞氏金蝇LAMP试剂盒

倍赞氏金蝇LAMP试剂盒产品规格：50T
产品运输：低温运输
产品保存：-20℃保存
产品有效期：一年
产品特点：
本产品就是根据保守区设计引物而开发的高灵敏 PCR检测试剂盒 。

FRMD6    FRMD6蛋白抗体
FAM161A    FAM161A蛋白抗体
FAM153B    FAM153B蛋白抗体
FAM46C    FAM46C蛋白抗体
TCRP1    舌癌化疗耐药相关蛋白1
FAM129B    FAM129B蛋白抗体
RMD2    微管动力调节蛋白2抗体
FAM50A    FAM50A蛋白抗体
FAM113A    FAM113A蛋白抗体
FAM150A    FAM150A蛋白抗体
FRMD8    FRMD8蛋白抗体
FGFR1OP    FGFR1癌基因伴侣蛋白抗体
FAM40A    FAM家族蛋白40A抗体
FAM55D    FAM55D蛋白抗体
FAM120B    组织激活过氧化酶活化增生受体γ蛋白抗体
FAM21C    FAM21C蛋白抗体
FAM13C1    FAM13C1蛋白抗体
FAM59B    FAM59B蛋白抗体
FAM59A    FAM59A蛋白抗体
FAM160B1    FAM160B1蛋白抗体
FAM161B    FAM161B蛋白抗体
FAM151A    FAM151A蛋白抗体
FAM156A    跨膜蛋白29抗体
FAM154A    FAM154A蛋白抗体
FAM155A    FAM155A蛋白抗体
FAM164B    FAM164B蛋白抗体
FRMD3    FRMD3蛋白抗体
FRMD4B    FRMD4B蛋白抗体
FRMD7    FRMD7蛋白抗体
倍赞氏金蝇LAMP试剂盒FRMD4A    FRMD4A蛋白抗体
FAHD2A    延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗体
FAM101A    FAM101A蛋白抗体
FAM102B    FAM102B蛋白抗体
FAM104B    FAM104B蛋白抗体
FAM107A    肾细胞癌下调蛋白1抗体
Factor VIII    凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体
FOLR2    胎盘叶酸受体蛋白2抗体
FAM13B1    FAM13B1蛋白抗体
FUT8    岩藻糖转移酶8抗体
FNIP1    卵泡刺激素结合蛋白1抗体
FHL2    相互作用蛋白FHL2抗体
FADS1    脂肪酸去饱和酶1抗体
FABP6    回肠脂肪酸结合蛋白抗体
FABP4    脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白
FAR2    脂肪酰辅酶A还原酶2抗体
FXR2    脆性X相关蛋白样2抗体
FAAH2    脂肪酸酰胺水解酶2抗体
Frizzled 7    卷曲蛋白FZD7抗体
FMDV Polyprotein (VPg2 protein)    口蹄疫病毒A型抗体
Phospho-FAK (Tyr925)    磷酸化粘着斑激酶抗体
human Fibrinogen    人纤维蛋白原抗体
FIZ1    锌指蛋白798抗体
FKBP10    肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP10抗体
FKBP11    肽基脯氨酰顺反异构酶FKBP11抗体产品特点：
1. 使用化学修饰的热启动聚合酶，反应特异性高，*程度地避免了非特异扩增；
2. 反应缓冲液经充分优化，反应灵敏快速，40个循环只需20多分钟；
3. 抗干扰能力强，反应重复性高，适合对土壤、粪便、肿瘤和血液来源的复杂样本中的靶基因进行检测分析。 在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，zui后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。
 特异性荧光标记：
 TaqMan法
 TaqMan探针的特性：
（1）5′端标记有报告基团（Reporter, R），如FAM、VIC等
（2）3′端标记有荧光淬灭基团 （Quencher, Q）
（3）探针完整，R所发射的荧光能量被Q基团吸收 ，无荧光， R与Q分开，发荧光
（4）Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性，可水解探针 相对定量通过内标定量：
内标（Endogenous Control）通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因，在细胞中的表达量或在基因组中定，受环境因素影响小，内标定量结果代表了样本中所含细胞或基因组数量。
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表： 试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量 荧光PCR反应液 14µL N×14µL 酶混合物 1 µL N×1 µL 总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。

实验方法步骤：
方法

1：在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。      10×PCR buffer 
                  5 μl     dNTP mix （2mM）   
          4 μl     引物1（10pM） 
                2 μl     引物2（10pM） 
                2 μl     Taq酶 （2U/μl）
                1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）
   1 μl      加ddH2O至 50 μl 
  视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2：调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，在72℃ 保温7min。
3：结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4：PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μl氯仿进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
PCR实验步骤
典型的PCR由（1）高温变性模板；（2）引物与模板退火；（3）引物沿模板延伸三步反应组成一个循环，通过多次循环反应，使目的DNA得以迅速扩增。其主要步骤是：
将待扩增的模板DNA置高温下（通常为93℃-94℃）使其变性解成单链；
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合，两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短；
耐热的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入，以目的基因为模板从5’→3’方向延伸，合成DNA的新互补链。