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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
需要自备的器材:
1.仪器:分析天平、离心机、荧光 PCR 扩增仪、组织研磨器、-20 ℃冰箱、可调移液器(2 µL、20 µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:荧光 PCR 专用反应管、眼科剪、眼科镊、生理盐水、1.5 mL 经焦碳酸二乙酯(DEPC)水 处理的灭菌离心管、吸头(10 µL、200 µL、1000 µL)、灭菌双蒸水。
Methamphetamine 甲基抗体
MIC1 结肠癌相关蛋白MIC1抗体
MHC Class II 组织相容性复合体β抗体
l-Myc Myc基因肺癌相关蛋白抗体
Megalin 糖蛋白gp330抗体
phospho-MyoD1 磷酸化肌原调节蛋白抗体
MAP4K1 造血祖细胞激酶1抗体
MAP4K4 丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
phospho-MAP3K7IP1 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
phospho-MAP3K7IP1 磷酸化转化生长因子β活化激酶结合蛋白1抗体
phospho-MAPK3 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶3抗体
phospho-MEK2 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶2抗体
phospho-MEF2D 磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
phospho-MEF2D 磷酸化肌细胞特异性增强因子2D抗体
Phospho-MAPKAPK2 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶活化的蛋白激酶2抗体
phospho-MAPKAPK5 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAPKAPK5 磷酸化p38调节/激活蛋白激酶抗体
phospho-MAP4K1 磷酸化造血祖细胞激酶抗体
PRAK p38调节/激活蛋白激酶抗体
MEF2D 肌细胞特异性增强因子2D抗体
phospho-MAP4K4 磷酸化丝裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗体
Phospho-MARCKS 磷酸化丙氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗体
MTGR1 髓易位基因相关蛋白1抗体
BBS6 巴德-毕德氏综合征蛋白BBS6抗体
MKLP2 有丝分裂驱动蛋白样2抗体
MFAP1 微原纤维胶原相关蛋白1抗体
MND1 减数分裂核分裂蛋白1抗体
MDFIC 肌原调节抑制蛋白抗体
转基因品系大豆DP356043 PCR试剂盒MDM2BP 双微体2癌基因结合蛋白抗体
MMP20 基质金属蛋白酶20
MRP8 多药耐药相关蛋白8抗体
MRP7 多药耐药相关蛋白7抗体
phospho-MLF1 Interacting Protein 磷酸化卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
MATK 酪氨酸蛋白激酶细胞分裂素抗体
MLF1 Interacting Protein 卡波西氏肉瘤疱疹病毒潜伏核抗原抗体相互作用蛋白1抗体
MAGEF1 黑色素瘤抗原抗体F蛋白家族1抗体
MGAT5 糖蛋白GNTVA抗体
MIIP IGFBP2结合蛋白/迁移和侵润抑制蛋白抗体
MAP1B 微管相关蛋白1B抗体
MSH3 错配修复蛋白3抗体
MDGA2 神经元膜糖蛋白锚定蛋白2抗体
MYRIP MYRIP蛋白抗体
Myelin PLP 髓磷酯髓鞘蛋白1抗体
MCSF 巨噬细胞克隆刺激因子抗体
4-Mar 膜相关环指蛋白4抗体特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品 DNA 模板,操作简单,定量准确快速。
2. 引物经过优化,特异性强。预期的 PCR 产物长度为 560 bp。
3. PCR mix 中含上样染料,PCR 后可以直接上样电泳。
4. 提供阳性对照,便于分析试验结果。
储存条件:
14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
(1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。
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文献和实验核酸提取 试剂 核酸扩增或转录——核酸扩增 试剂 产物检测试剂(有些使用全自动分析仪的PCR方法因其核酸扩增和检测同时完成,故无专门的产物检测试剂) 寡核苷酸引物和探针 缓冲液和dNTP 聚合酶 、逆转录酶等 更多详细内容: 马上下载
请教real time PCR的RT部分能否使用传统半定量RT-PCR试剂盒的反转录部分?
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