万千商家帮你免费找货
0 人在求购买到急需产品
- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温冷藏
- 保质期:
详见说明书
- 库存:
100
- 供应商:
上海莼试
- 规格:
50T
典型的PCR由
(1)高温变性模板;
(2)引物与模板退火;
(3)引物沿模板延伸三步反应组成一个循环,通过多次循环反应,使目的DNA得以迅速扩增。
其主要步骤是:
将待扩增的模板DNA置高温下(通常为93℃-94℃)使其变性解成单链;
人工合成的两个寡核苷酸引物在其合适的复性温度下分别与目的基因两侧的两条单链互补结合,两个引物在模板上结合的位置决定了扩增片段的长短;
耐热的DNA聚合酶(Taq酶)在72℃将单核苷酸从引物的3’端开始掺入,以目的基因为模板从5’→3’方向延伸,合成DNA的新互补链。
骨成型蛋白受体Ⅱ (BMP-R2) ELISA 48T/96T 进口分装
脑钠肽 (BNP) ELISA 48T/96T 进口分装
脑钠前肽 (pro-BNP) ELISA 48T/96T 进口分装
骨涎蛋白 (BSP) ELISA 48T/96T 进口分装
β 细胞素 (BTC) ELISA 48T/96T 进口分装
人 B7-H4(B7-H4) ELISA 48T/96T 进口分装
b - 防御素 ( b -Defensin) ELISA 48T/96T 进口分装
骨成型蛋白 -6(BMP-6) ELISA 48T/96T 进口分装
骨成型蛋白 -15(BMP-15) ELISA 48T/96T 进口分装
降钙素 (Calcitonin) ELISA 48T/96T 进口分装
P- 钙粘着蛋白 (P-Cadherin) ELISA 48T/96T 进口分装
环磷酸腺苷 (cAMP) ELISA 48T/96T 进口分装
心营养素 -1(Cardiotrophin-1) ELISA 48T/96T 进口分装
Caspase-1 ELISA 48T/96T 进口分装
Caspase-2 ELISA 48T/96T 进口分装
Caspase-3 ELISA 48T/96T 进口分装
Caspase-10 ELISA 48T/96T 进口分装
钙粒蛋白 C(Calgranulin C) ELISA 48T/96T 进口分装
组织蛋白酶 S(Cathepsin S) ELISA 48T/96T 进口分装
钙调蛋白 (Calponin) ELISA 48T/96T 进口分装
白细胞分化抗原 14 ( CD14 ) ELISA 48T/96T 进口分装
白细胞分化抗原 23 ( CD23 ) ELISA 48T/96T 进口分装
白细胞分化抗原 30(CD30) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性白细胞分化抗原 30 配体 (sCD 30L ) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性细胞表面分化抗原 40 配体 (sCD 40L ) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性 CD11b(sCD11b) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性 CD44v6(sCD44v6) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性 CD138 分子 (sCD138) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性 CD146 分子 (sCD146) ELISA 48T/96T 进口分装
可溶性 CD163 分子 (sCD163) ELISA 48T/96T 进口分装
环磷酸鸟苷 (cGMP) ELISA 48T/96T 进口分装
次级淋巴组织趋化因子 6Ckine(CCL21) ELISA 48T/96T 进口分装
补体 C 3a (C 3a ) ELISA 48T/96T 进口分装
补体片段 C 5a (C 5a ) ELISA 48T/96T 进口分装
胆囊收缩素 (CCK-8) ELISA 48T/96T 进口分装
水稻内标准SPS基因PCR试剂盒Clara 细胞分泌蛋白 (CCSP) ELISA 48T/96T 进口分装
人 C-Fos ( C-Fos ) ELISA 48T/96T 进口分装
降钙素基因相关肽 (CGRP) ELISA 48T/96T 进口分装
睫状神经营养因子 (CNTF) ELISA 48T/96T 进口分装
环氧合酶 -2(COX-2) ELISA 48T/96T 进口分装
C 反应蛋白 (CRP) ELISA 48T/96T 进口分装
促肾上皮质激素释放肽 (CRH) ELISA 48T/96T 进口分装
粒细胞集落刺激因子 (G-CSF) ELISA 48T/96T 进口分装
粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子 (GM-CSF) ELISA 48T/96T 进口分装
粒细胞 - 巨噬细胞集落刺激因子抗体 (GM-CSF Ab) 操作步骤 :
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM 5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。 3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验30 s);第三阶段72 ℃延伸7 min。5、核酸检测对PCR 产物进行凝胶电泳。SPS 扩增产物大小277 bp,Bt 扩增产物大小301 bp。6、结果确认采用含Bt 基因的质粒作为阳性对照,确认不含Bt 基因的水稻做印性对照。阳性对照SPS与Bt 基因都扩增出来,阴性对照只扩增出SPS 基因。待测样本如扩增出SPS 基因,表明含水稻成份。如扩增出SPS 基因和Bt 基因,表明含转基因水稻成份。普通PCR 实验只能确定样本中是否含转基因成份。需要确认转基因水稻含量可以通过Realtime
为几天。尤其对于低丰度基因的克隆优势更为显著[1]。 我们实验室用在合成cDNA的双链后,在两端连上接头引物,利用已知的接头序列再进行扩增,或者是利用末端转移酶在双链cDNA的3'末端加上一连串的G或者C(或者A/T),再通过补齐粘末端,利用已知的两头序列进行扩增,分别从水稻和小麦中克隆到了TPT[2,3]。但是这些方法不同程度的存在一些问题,比如接头的连接效率非常有限,会导致部分信息的丢失,再加上这些方法需要多次用不同的酶处理有限的样品,需要经过反复的纯化,会损失很多有用的信息,特别是少量样品
【旧贴整理】2006年4月下旬无人应助贴整理,希望大家积极应助!
/post/view?bid=67&id=6008017&sty=1&tpg=28&age=0 【求助】λ噬菌体插入水稻基因PCR检测 http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6060641&sty=1&tpg=20&age=0 【求助】帮帮我可以吗?谁有血管紧张素转换酶基因插入/缺失多态性的示意图! http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6062552&sty=1&tpg=20&age=0 【求助】标本
技术资料暂无技术资料 索取技术资料




