小鼠脾脏成纤维样细胞；C57/B6-SPL

细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

订购信息：

产品名称	小鼠脾脏成纤维样细胞；C57/B6-SPL
生长特性	贴壁生长
货号	XG-X18044

细胞名称    小鼠脾脏成纤维样细胞；C57/B6-SPL
形态特性  成纤维样细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性  该细胞系来源于一正常雄性C57/B6小鼠的脾脏组织。2013年由中科院昆明细胞库建立。
培养条件  DMEM-H: Dulbecco＇s Modified Eagle＇s Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  10%FBS
传代方法  1:2传代；3-4天一次
传代情况 P2
冻存条件  基础培养基+5%DMSO+20%FBS
支原体检测 荧光法（-）
STR  -
同工酶     
染色体      　
使用权限     A类
细胞的种类：
产品仅用于科研第一种：
是冻存产品，由液氮直接拿出，干冰运输给客户。一般不推荐这种，也较少使用这种方式，因为复苏手法对于细胞状态影响较大，一旦细胞状态不好，很难说是细胞自身不行，还是复苏没操作好；另外温度对细胞、基因功能状态影响很大，也不是细胞储存的zui好方式，快递时间也很难控制，多种因素影响产品的质量；干冰运输需要额外添加400元的运费(顺丰)。
第二种：
是我们复苏好细胞，QC通过后，T-25灌满培养基常温运输给客户，排除复苏造成影响，常温运输也对细胞影响也不大，只需加25元运费(顺丰)。
质量保证：我们的细胞株来源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，购买到货后，由我们实验室扩增、冻存，冻存的产品全部经过QC检测，100%进口来源，100%保证5代以内，活力>95%，无细菌、真菌、支原体污染。的冻存是细胞培养的基本操作，不同的实验室采用的方法略有差异，但是都会遵循慢冻速溶的宗旨。
细胞处理：
1）复苏细胞产品名称：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
方法二：可选择半数换液方式，弃去半数培养基后，将剩余细胞悬起，将细胞悬液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。悬浮细胞冻存时，应将细胞收集，1000RPM，常温条件下离心5分钟，少量保存上清液（防止细胞吸走），加入部分新鲜培养基，吹打均匀后，加入到冻存管中，在冻存管中加入10%DMSO摇匀后进行冻存。冻存培养基
冻存细胞时必须使用推荐的冻存培养基。冻存培养基中应含有 DMSO 或者甘油等冷冻保护剂。还可使用专门配制的完全冻存培养基。
1）细胞冻存培养基是一种用于哺乳动物细胞的即用型完全冻存培养基，其所含胎牛血清和牛血清比例经过优化，可改善细胞活力以及解冻后的细胞复苏效果。 
2）冻存培养基是一种化学成分确定的、无蛋白、无菌冻存培养基，含10% DMSO，适用于多种干细胞和原代细胞 (黑色素细胞除外) 的冻存。
LAIR2 Others Human 人 LAIR2 / CD306 人细胞裂解液 (阳性对照) 培哚普利质量规格：>98%,盐形式Perindopril erbumine
LA795瘤 肺腺癌保泰质量规格：>98%,USPphenylbutazone
SK-OV-3人卵巢癌细胞 Human ovarian cancer cell line SK-OV-3 McCoy'5A+10% FBS盐酸纳曲酮质量规格：>99%,BRNaltrexone hydrochloride
FLT3LG Protein Mouse 重组小鼠 FLT3L / Flt3 ligand 蛋白 (Fc 标签)三苯胂氧化物质量规格：BRTriphenylarsine oxide
小鼠骨髓间充质肝细胞(MMSC-bm)(5×105) PANC-1, 人胰腺癌细胞 Human5,7,4'-三羟基-8-甲基二氢黄酮(标准品)质量规格：HPLC≥98%,标准品5,7,4’-Trihydroxy-8-methylflavanone
HCC1428细胞，人癌细胞 人小细胞肺癌细胞,LTEP-P细胞 晶状体上皮细胞Many types of cells包装：5 × 105方(1ml)无水溴化锂(>98%,BR)质量规格：>98%,BRLithium bromide
狗肺成纤维样细胞;DogL1偏1酸锂(>98%,BR)质量规格：>98%,BRLithium metaphosphate
TNFRSF4 Others Human 人 TNFRSF4 / CD134 人细胞裂解液 (阳性对照) 草酸锂(>98%,BR)质量规格：>98%,BRLithium oxalate
CL-0183PA317(小鼠成纤维细胞)5×106cells/瓶×2硬脂酸锂(>98%,BR)质量规格：>98%,BRLithium stearate
SELP Others Human 人 SELP / selectin P / P-selectin 人细胞裂解液 (阳性对照) 3,4-苯并芘(升华精制品)(>95.0%(GC))质量规格：>95.0%(GC)3,4-Benzopyrene (purified by sublimation)
CSF1 Protein Mouse 重组小鼠 M-CSF / CSF-1 蛋白 (His 标签)Aminometxylresin甲基树脂25克BR
Tca-8113(人舌鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 野生型人c-kit受体细胞株;A7d1,2,4,5-本四安四言醋盐 1,2,4,5-BqNZqNqTqTRcMINq TqTRcxy7noCHLORIDq 4206-66-2
人神经元cDNAHN cDNA言醋二安四环速 Minocyclinq xy7nochloridq 13614-98-7
IL11RA Others Canine 狗 IL11RA / IL-11RA / IL11Rα 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-IP异戊1酰嘌呤10克BR，99%
615小鼠网织细胞性白血病瘤株;L615MEndoBrothMF 100g原装/500g原装 BD 274920
小鼠脾脏成纤维样细胞；C57/B6-SPL人前列腺癌细胞;DU 145 [DU145;DU-145]GENE-PAGEPLUS8% 8% GENE-PAGE PLUS, 7 M 尿素生物技术级透明无色无颗粒液体COLDsigma
TNFRSF14 Others Mouse 小鼠 HVEM / TNFRSF14 人细胞裂解液 (阳性对照) 3-基-1-(阴凉) 3-Mqthyl-1-butqnq 263-42-1
CM-H125人脑成纤维细胞完全培养基100mLL-ASPARTICACIDL-天门冬酸高级白色粉末RTsigma
ANGPTL7 Others Canine 狗 ANGPTL7 / Angiopoietin-like 7 人细胞裂解液 (阳性对照) AEBSFAEBSF超级白色至米白色结晶COLDsigma
人颅骨成骨细胞HCO58-55-9茶碱;;;3,7-二氢-1,3-二甲基-1H-嘌呤-2,6-二酮;2,6-二羟基-1,3-二甲基嘌呤Theophylline;1,3-Dimetxyl xanthine;1,3-Dimetxyl-2,6-dihyroxypurine
注意事项：
1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色
，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。
2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。
3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。
6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。