Kinase suppressor of Ras 2 ELI

Kinase suppressor of Ras 2 ELISA Kit自备实验器材（不提供，可代购）
1． 酶标仪（主波长 450nm，参考波长 630nm）
2． 高精度移液器及一次性吸头：0.5-10,2-20,20-200,200-1000μl
3． 洗板机或洗瓶
4． 37℃孵育箱
5． 双蒸水，去离子水，量筒等
6． 稀释用聚丙烯试管

MAP3K5/ASK1/MEKK5  细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.1ml
phospho-ASK1 (Ser966)  磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.1ml
phospho-ASK1(Ser967)  磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.2ml
phospho-ASK1(Thr845)  磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.1ml
phospho-ASK1(Ser83)  磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.1ml
phospho-ASK1(Ser1033)  磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体     0.1ml
phospho-MEK3(Thr222)  磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶3抗体     0.1ml
Maspin  抑癌基因抗体     0.1ml
MASP  甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶1抗体     0.2ml
MAL  MAL蛋白抗体     0.1ml
MASP2  甘露聚糖结合凝集素丝氨酸肽酶2抗体     0.1ml
Matriptase  蛋白裂解酶（一种新的癌基因）抗体     0.1ml
RbAp48  视网膜母细胞瘤结合蛋白P48抗体     0.2ml
MBP  髓鞘碱性蛋白（磷脂碱性蛋白）抗体     0.1ml
FAM123B/AMER1/Wilms tumor on the X  肾母细胞瘤基因X染色体蛋白抗体     0.2ml
phospho-MBP(Thr232)  磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体     0.1ml
Cytomegalovirus pp65   巨细胞病毒PP65/CMV低基质磷脂蛋白抗体     0.1ml
phospho-MBP(Tyr203)  磷酸化髓鞘碱性蛋白抗体     0.1ml
HCMV  人巨细胞病毒抗体     0.1ml
HCMV UL23  人巨细胞病毒UL23抗体     0.1ml
HCMV UL49  人巨细胞病毒UL49蛋白抗体     0.1ml
HCMV UL49  人巨细胞病毒UL49蛋白抗体     0.2ml
hnRNP F  异质核糖核蛋白F抗体     0.2ml
hnRNP L  异质核糖核蛋白L抗体     0.2ml
WNT4  信号通路Wnt4抗体     0.2ml
Wnt6  信号通路Wnt6抗体     0.2ml
Adenovirus 5 E1A  腺病毒早期E1A蛋白抗体     0.2ml
MCP1/CCL2  单核细胞趋化蛋白1抗体     0.1ml
MCP1/CCL2  单核细胞趋化蛋白1抗体     0.1ml
MCP-2/CCL8  单核细胞趋化蛋白2抗体     0.2ml
MCP-2/CCL8  单核细胞趋化蛋白2抗体(小鼠)     0.1ml
MCP-3/CCL7  单核细胞趋化蛋白3抗体     0.1ml
MCP-3/CCL7  单核细胞趋化蛋白3抗体     0.2ml
CCL9/CCL10/MIP-1 gamma/SCYA10  巨噬细胞炎症蛋白-1γ抗体     0.1ml
Mast Cell Tryptase  肥大细胞蛋白酶7抗体     0.1ml
TPSB2  肥大细胞类胰蛋白酶β2     0.1ml
MC-1R  黑皮质素-1受体抗体     0.1ml
MCSF Receptor  巨噬细胞集落刺激因子受体抗体     0.1ml
试剂准备：
1. 试剂回温：首先在实验前 30 min 将试剂盒，待测样本放置于室温下，浓缩洗涤液如出现结晶，请放入37℃温浴直到结晶全部溶解。
2. 配制洗涤液：预先计算好稀释后的洗涤液使用体积，然后用双蒸水或去离子水将 20 倍浓缩洗涤液稀释成 1 倍应用液，未用完的浓缩洗涤液放入 4℃冰箱保存。
3. 标准品梯度稀释：加入标准品/样本稀释液（SR1）0.5ml至冻干标准品中，静置15分钟待其完全溶解后轻轻混匀(浓度为8000pg/ml)，然后在其余七管中各加入500L标准品/样本稀释液（SR1），按照以下浓度进行2倍稀释：8000、4000、2000、1000、500、250、125、0 pg/ml进行稀释。8000pg/ml标准曲线高点浓度，标准品/样本稀释液（SR1）作为标准曲线的零点（0pg/ml）。复溶过的标准品原液（8000pg/ml）未用完的应废弃或根据需要按照一次用量分装，并将其贮存在-20～-80℃冰箱。
5. 酶结合物工作液：按每次试验所需用量配制，用酶结合物稀释液（SR3）将100倍浓缩酶结合物稀释成1倍应用工作液（稀释前离心），请在30分钟内使用。
6. 洗涤方法：
自动洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，注入洗涤液为 300ul/孔,注与吸出间隔为 30 秒，洗板 5 次。
手工洗板：甩尽酶标板孔中液体，在厚迭吸水纸上拍干，用洗瓶加入洗涤液 300ul/孔，静止30 秒后甩净酶标板孔中液体，在厚迭的吸水纸上拍干，洗板 5 次。

Kinase suppressor of Ras 2 ELISA Kit结果判断：
1.用酶标仪 450 nm 波长测定 OD 值。选择双波长检测，参考波长为 630 nm。如不能进行双波长检测，请用 450 nm 的 OD 测定值减去 630 nm 的 OD 测定值。
2.计算标准品、样品的平均 OD 值：每个标准品和标本的 OD 值应减去零孔的 OD 值
3.以标准品浓度为横坐标，吸光度OD值为纵坐标，用软件绘制标准曲线，样品中CCL28含量可通过对应OD值由标准曲线换算出相应的浓度。
4.若标本 OD 值高于标准曲线上限，应做适当稀释后重新检测，计算浓度时再乘以稀释倍数。