Guanylate-binding protein 4 EL

Guanylate-binding protein 4 ELISA Kit需要而未提供的试剂和器材
1. 酶标仪（450nm）
2. 高精度加样器及枪头：0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
3. 37℃恒温箱
4. 蒸馏水或去离子水

样本处理及要求
1. 血清：将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜，然后1000×g离心20 分钟，取上清即可，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本，并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：请1000×g离心20分钟，取上清即可检测，或将上清置于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

0.1ml
phospho-PTPN6(Tyr476)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体     0.1ml
ZEB1/AREB6  负调控因子白细胞介素2抗体     0.2ml
phospho-PTPN6(Tyr536)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体     0.1ml
phospho-PTPN6(Ser591)  磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体     0.1ml
PTPN6/SHP1  蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗体     0.1ml
SIRT1  沉默调节蛋白1抗体     0.1ml
Phospho-SirT1 (Ser27)  磷酸化沉默调节蛋白1抗体     0.1ml
Phospho-SIRT1(Ser47)  磷酸化沉默调节蛋白1抗体     0.1ml
SIRT6  沉默调节相关蛋白6抗体     0.2ml
phospho-SIRT6(Ser338)  磷酸化沉默调节相关蛋白6抗体     0.1ml
Skp2/skp2 p45  细胞S期激酶相关蛋白2抗体     0.1ml
SLC4A4  碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4抗体     0.1ml
Slc4a7/Nbcn1  碳酸氢钠协同转运蛋白4-A7抗体     0.2ml
SLC9A9  钠氢通道蛋白9家族A9抗体     0.2ml
SLC39A7  转运蛋白家族39成员7抗体     0.2ml
NGALR/Slc22A17  可溶性载质转运蛋白22A17抗体     0.1ml
SLC24A5  可溶性载质转运蛋白SLC24A5抗体     0.1ml
SLCO2B1/OATPB  可溶性载质转运蛋白2B1抗体     0.2ml
SLC25A10  线粒体二羧酸载体蛋白抗体     0.2ml
SLC25A11  线粒体二羧酸载体蛋白11抗体     0.2ml
Slc26a5  感觉神经性耳聋常染色体隐性遗传61抗体     0.2ml
SLC25A13  线粒体内钙结合天冬氨酸/谷氨酸载体蛋白抗体     0.2ml
SLC37A4/G6PT2  葡萄糖-6磷酸转运蛋白抗体     0.2ml
SLC6A19  钾依赖钠钙交换蛋白6     0.1ml
Guanylate-binding protein 4 ELISA KitSLC7A9  离子转运相关蛋白SLC7A9抗体     0.2ml
SLC16A7/MCT2  单羧酸转运蛋白2抗体     0.1ml
SLC16A3/MCT4  单羧酸转运蛋白3/4抗体     0.2ml
Smac/DIABLO  线粒体促凋亡蛋白抗体     0.1ml
SLC33A1  乙酰辅酶A转运蛋白1抗体     0.2ml
SLC34A2  磷酸钠协同转运蛋白抗体     0.1ml
SLC27A2/ACSVL1  长链脂肪酸辅酶A连接酶抗体     0.2ml
CRIM1  富含半胱氨酸运动神经元蛋白1抗体     0.1ml
Slit2/Slil3  神经迁移蛋白Slit2/3抗体     0.1ml
SLT/SLT-IIe/O139  猪水肿素(O139)菌体蛋白抗体     0.2ml
SLC39A6  SLC39A6抗体     0.1ml
SNAI2/SLUG  锌指转录因子Slug抗体     0.1ml
phospho-SNAI2(Ser155+Ser158+Ser160+Tyr164+Tyr169)  磷酸化锌指转录因子Slug抗体     0.1ml
SLC40A1  细胞膜铁转运蛋白FP1抗体     0.1ml
SLC44A1/CD92  溶质转运蛋白家族44成员1抗体     0.2ml
Smad1  细胞信号转导分子Smad-1抗体     0.1ml
Phospho-Smad1(Ser206)  磷酸化细胞信号转导分子Smad-1抗体     0.1ml
Phospho-Smad1/5(Ser463/465)  磷酸化细胞信号转导分子Smad-1/5抗体     0.1ml
Smad2  细胞信号转导分子Smad-2抗体     0.1ml
phospho-Smad2(Ser465)  磷酸化Smad2抗体     0.1ml
Smad4  Smad4抗体     0.1ml
SMAD5  细胞信号转导分子SMAD5抗体     0.1ml
Smad7/Smad6  Smad 7抗体     0.1ml
phosphor-SMAD2(Ser425)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体     0.1ml
Phospho-Smad2(Ser465/467)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体     0.1ml
Phospho-Smad2(Ser245/250/255)  磷酸化细胞信号转导分子SMAD2抗体     0.1ml
实验材料与试剂配制：
1. 仪器与材料：酶标仪（使用前预热30分钟），微量加液器、吸头、蒸馏水或去离子水，滤纸。
2. 缓冲液使用：加5ul 的缓冲液于50ul 的样品中，如果样品量不够或者不确定，缓冲液和样品的混合比例不要小于1:10即可。
混匀，静置1小时备用（如果标本是血清或者血浆，此步骤忽略）。
3. 洗液的配制：按1:100的比例配制洗液备用。
操作步骤：
1. 取出试剂盒，室温（20-25℃）放置 30 分钟。 2. 分组：取出 96 孔板，根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数，把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组（6 个浓度）、空白孔、待测样品组。
注：为减少实验误差，保证准确性，建议设置复孔。
3. 加样：依照标准品的顺序分别加入 50ul 的标准品溶液于空白微孔中；空白对照孔加入 50ul 的蒸馏水；其余微孔中加入 50ul的待测样本。
4. 加酶标溶液：标准品组、待测样本组各孔中加入 100ul 的酶标溶液（空白对照孔除外）。
5. 温育：酶标板用封板纸密封后，放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。
6. 洗板：用稀释后的洗涤液注满每孔，静置 15-30s，充分清洗酶标板 5 次，用吸水纸彻底拍干。 7. 显色：各孔加入显色剂 A 液 50ul 后，再加入显色剂 B 液 50ul。
8. 终止：25-37℃下避光反应 10-15 分钟，加入 50ul 终止液。
9. 读板：在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。